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馬克洛菌PCR檢測試劑盒說明書

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更新時間:2026-06-08 15:35:12瀏覽次數(shù):6868次

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產(chǎn)地 進(jìn)口 產(chǎn)品新舊 二手
自動化程度 其他
馬克洛菌PCR檢測試劑盒說明書是即用型PCR試劑盒的改良產(chǎn)品, 含有Taq DNA 聚合酶、dNTPs、MgCl2、反應(yīng)緩沖液、PCR 增強(qiáng)劑、上樣染料等所有PCR 所需要的成分,用戶只需加入模板和引物即可進(jìn)行PCR 反應(yīng),具有廣泛的用途。

特點:
高特異性:與其他病毒無交叉反應(yīng),無非特異性擴(kuò)增;
高靈敏度:檢測靈敏度可達(dá)10~100;
操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時進(jìn)行多個檢測;
高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。

產(chǎn)品名稱

馬克洛菌PCR檢測試劑盒說明書

英文名稱

Crossiella equiPCR

分類

PCR檢測試劑盒

樣品 DNA 的制備:
1.用自選方法純化樣品的 DNA,本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒 DNA 提取試劑盒兼 容。。也可以選購本公司的一管式病毒 DNAout 或其升級版柱式病毒 DNAout。 本試劑盒免費贈送 15 次 DNA 病毒裂解液試用裝(一管式病毒 DNAout 的成分)。
稀釋陽性對照(以 10E2-10E7 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的長為 86bp 的 DNA 片段作為陽性對照。
2.標(biāo)記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3.用帶芯槍頭分別加入 45 μL 模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4.在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。5.換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
6.換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7.換槍頭,在 4 號管中加 5 μL 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照到 4 號管中,得1×10E4 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。8.重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
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使用及效果:
PCR反應(yīng)特點
(1) 特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性;
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細(xì)胞中檢出一個靶細(xì)胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達(dá)3個RFU(空斑形成單位);在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個細(xì)菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
(4) 對標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板??芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。

反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會。

人信號傳導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子5A(STA5A)ELISA試劑盒10mg 0.78-50 ng/mL二氫山芹醋酸酯 ACETYLCOLUMBIANETIN, O-(RG)(PLEASE CALL)

人紅白血病細(xì)胞,HEL細(xì)胞 20mg HPLC≥98%Parishin C巴利森苷C 174972-80-6用于含...1 x 10^6 cells/T25培養(yǎng)瓶巴利森苷C

人絲氨酸蛋白酶(PRSS)ELISA試劑盒1mg 15.6-1000 pg/mLMallow (Malva neglecta) Aerial Extract #5 BXL(REQUEST QUOTE)

登革熱病毒Ⅰ型(DFV-Ⅰ)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)53947-92-5 20mgcorylin HPLC≥98% 15.6-1000 pg/mL補(bǔ)骨脂寧;補(bǔ)骨脂異黃

JAML/AMICA1抗體,鼠單抗 302-22-7 100mg 0.978ELISA   醋酸氯地孕(含干冰運輸費)

人CXC趨化因子受體4(CXCR4)ELISA試劑盒88182-33-6 20mg Levistilide A 15.6-1000 pg/mL歐當(dāng)歸內(nèi)酯A

CCL18/PARC/MIP-4抗體,兔多抗,抗原親和純化A0734ELISA   IHC-P   7-乙氧基莫諾苷

ELISAKitforHumanHistidine-richglycoprotein87932-34-15mg Hydroxyphenethylanisate 15.6-1000 pg/mL茴香酸對羥基苯乙酯

Alpha-2-glycoprotein/AZGP1抗體,兔單抗28957-04-2C20H28O6Oridonin≥98%ELISA   冬凌草素

人白三C4合成酶(LTC4synthase)ELISA試劑盒500mg 78-5000 pg/mL1-十六烷/鯨蠟 CETYL ALCOHOL(1-HEXADECANOL)(SG)

豆粉瓊脂100ml/500ml 250g石炭酸復(fù)紅染液(苯品紅染液)

ELISAKitforHumanPhosphatidylinositol-5-phosphate4-kinasetype-2gamma1mg 78-5000 pg/mLGermander (Teucrium chamaedrys) Aerial Parts Extract #6 BXL(REQUEST QUOTE)

14-3-3beta/YWHAB抗體(FITC),鼠單抗HPLC≥98%A08215mg/支FCM   遠(yuǎn)志皂苷B

人轉(zhuǎn)化生長因子β受體2(TGFR-2)ELISA試劑盒50mg 0.156-10 ng/mL硝阿托品 ATROPINE METHYL NITRATE(P)

人內(nèi)皮祖細(xì)胞 20mg HPLC≥98%Methyl hesperidin用于含量測定1 x 10^6 cells/T25培養(yǎng)瓶基橙皮苷

FibronectinFragment2抗體,兔多抗,抗原親和純化100mgELISA   WB   IP  鹽酸環(huán)胞苷 CYCLOCYTIDINE HCL(RG)

馬克洛菌PCR檢測試劑盒說明書硝阿托品 ATROPINE METHYL NITRATE(SH)  250mg 人腫瘤壞死因子α誘導(dǎo)蛋白3(TNFalpha-inducedprotein3)ELISA試劑盒

乙酰紫堇靈; 乙酰紫堇靈堿 HPLC≥98% A0440 GPA33抗體,兔多抗,抗原親和純化 20mg/支

Myoglobin肌球(紅)蛋白  100mg 酶試劑

雙去氧基姜黃素 HPLC≥95% A0088 SerpinA6抗體,兔多抗 20mg/支

BACOSIDE A3(P)  10mg ELISAKitforHumanNeuromedin-S

SDS 十二烷基*  100g MPC瓊脂培養(yǎng)基

玉米素核苷 玉精核糖甙 反玉米素核苷  50mg 哥倫比亞血瓊脂基礎(chǔ)(改良)

雷公藤素;雷公藤內(nèi)酯;雷公藤多甙 20mg Triptolide ELISAKitforHumanProbablecation-transportingATPase13A2 HPLC≥98%

 

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