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ELISA試驗中陰性的顯色和陰性的本底
以常用的間接法測抗體和夾心法測抗原為例。陽性標(biāo)本中含有檢測系統(tǒng)中特異的抗體或抗原,作為橋梁聯(lián)結(jié)免疫吸附劑和酶結(jié)合物,使酶結(jié)合物吸附在固相上,無色底物在酶的作用下轉(zhuǎn)變成有色產(chǎn)物,這就是陰性的顯色,顯色的深度與陽性標(biāo)本中待測抗體或抗原的量成正比。陰性標(biāo)本中不含待測的抗體或抗原,酶結(jié)合物不能聯(lián)結(jié)在固相上,故不顯色。但ELISA是一個復(fù)雜的、多步驟的反應(yīng)過程,反應(yīng)各步中酶結(jié)合物都有可能非特異性的吸附在固相載體上,與底物反應(yīng)呈現(xiàn)顏色,這就形成了陰性的本底。
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