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北京方程嘉鴻科技有限公司


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公司動態(tài)

普通PCR,熒光定量PCR技術(shù)服務(wù),實驗代做

發(fā)布時間：2013-11-6

北京方程生物實驗室代做實驗，具體項目有：普通PCR、熒光定量PCR、TUNEL凋亡、HE染色、Western Blotting 、Elisa檢測等，

：王 ：  在線客服：21570372

 

實時熒光定量PCR技術(shù)即是在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團，利用熒光信號實時監(jiān)測整個PCR進程，zui后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR避免了傳統(tǒng)PCR以終產(chǎn)物檢測定量產(chǎn)生的偏差，提高實驗的重復(fù)性。該技術(shù)已被廣泛用于檢測細胞mRNA表達量的變化；比較不同組織的 mRNA表達差異；驗證基因芯片，siRNA干擾的實驗結(jié)果等。

 

SYBR Green熒光染料法：SYBR Green是一種DNA結(jié)合染料，能非特異地摻入到雙鏈DNA中去。在游離狀態(tài)下，它不發(fā)出熒光，但一旦結(jié)合到雙鏈DNA中以后，便可以發(fā)出熒光。它的zui大優(yōu)點就是可以與任意引物、模板相配合，用于任意反應(yīng)體系中。從經(jīng)濟角度考慮，它也比其它的探針的價格要便宜得多。但由于它能與所有的雙鏈DNA結(jié)合，所以一旦反應(yīng)體系中出現(xiàn)非特異擴增，那它就會影響到定量結(jié)果的可靠性與重復(fù)性。要避免這種不利因素，可以通過選擇良好的引物并優(yōu)化反應(yīng)條件以消除非特異性影響。

 

TaqMan熒光探針法：PCR擴增時在加入一對引物的同時加入一個特異性的熒光探針，該探針為一寡核苷酸，兩端分別標記一個報告熒光基團和一個淬滅熒光基團。探針完整時，報告基團發(fā)射的熒光信號被淬滅基團吸收；PCR擴增時，Taq酶的5-3外切酶活性將探針酶切降解，使報告熒光基團和淬滅熒光基團分離，從而熒光監(jiān)測系統(tǒng)可接收到熒光信號，即每擴增一條DNA鏈，就有一個熒光分子形成，實現(xiàn)了熒光信號的累積與PCR產(chǎn)物形成*同步。

項目

說明

引物設(shè)計合成

客戶提供基因名稱（中英文全稱）。

RT-PCR檢測（普通電泳PCR）

包括所有試劑，提供分析數(shù)據(jù)、步驟。

實時熒光定量（Taqman探針法）

包括所有試劑，提供分析數(shù)據(jù)，圖片、步驟（20例起）

SYBR Green 染料法

包括所有試劑、提供數(shù)據(jù)、圖片、實驗步驟。

 


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