1. 真空采血管的選擇：以往真空采血管的材質(zhì)多為玻璃材料，玻璃試管的主要成分是親水性硅酸鹽，采血后玻璃試管內(nèi)壁可出現(xiàn)吸附水分子的吸水層，所以分離膠不能直接黏附于玻璃試管的內(nèi)壁。隨著放置時間的延長，紅細胞中的鉀或者酶等物質(zhì)，可以通過水分子吸水層向血清中擴散。所以，玻璃采血管在原狀態(tài)下保存血清的期限以2~3d為宜。塑料采血管常為聚對苯二甲酸（乙二）醇酯（polyethyleneterephthalates，PET）材質(zhì)，疏水性質(zhì)、其管壁不發(fā)生水分子層，分離膠可牢固地黏附著內(nèi)壁上，紅細胞中的鉀不能擴散到血清中，因而冷藏保存8d血清鉀含量不變。PET塑料真空采血管可在-20℃保存標本，這是普通塑料試管和玻璃試管難以達到所以，選擇真空采血管時盡量用PET塑料采血管為佳。
2. 推薦的采血順序： 凝血管（血清管）→枸櫞酸鈉管→肝素或EDTA管→草酸鉀-氟化鈉管→血沉管。主要原因是*管內(nèi)往往含有組織液，易造成凝血，不適于做血凝測定。
3. 取血時患者應松弛，環(huán)境溫暖，防止靜脈攣縮，束膊時間不可過長，禁止拍打手臂，否則可造成局部血液濃縮或激活凝血系統(tǒng)。觀察采血是否順利，采血量是否符合要求。由于實驗室樣本量的不斷增加，傳統(tǒng)實驗室分離血清標本的速度與全自動化分析儀很不同步，因為血液凝固速度與玻璃試管和塑料試管的激活能力、溫度密切相關。實驗證明，凝血因子中的Ⅺ、Ⅻ因子接觸玻璃試管壁后被激活，一般采血后在23~25℃室溫條件下，30min大部分血液已凝固，*凝固需要1h。但是，疏水性的塑料試管壁接觸凝血因子Ⅺ、Ⅻ時，被激活的能力非常弱，需要2~4h血液才能*凝固，影響了分離血清的速度。在采血試管內(nèi)壁表面噴涂血液促凝劑才能解決上述存在的問題。采血后輕輕倒轉試管混合4~5次，置室溫立放待血液*凝固后離心，血液呈現(xiàn)收縮狀態(tài)，可觀察到有血清滲出現(xiàn)象，證明血液*凝固。
4. 血清分離膠促凝采血管離心操作的要求：如何正確地使用分離膠促凝管制備高質(zhì)量血清標本，血液*凝固和離心條件是至關重要的兩個環(huán)節(jié)，離心要求采用水平式離心機。具體操作步驟是:采血后立即輕輕倒轉采血試管4~5次混勻標本，等待標本充分凝固需要放置30min，離心半徑8cm，離心速度維持在3500~4000r/min離心10min。血清與血凝塊*被分離膠分離，血清標本可直接上機檢測或轉移至儀器配套試杯中。具備這個條件才能制備出高品質(zhì)血清標本，說明分離膠效果好。如果離心速度過低，作用于分離膠的力比較弱，分離膠返轉不佳或者血液沒有*凝固就離心，可出現(xiàn)纖維蛋白凝狀物停留在血清中或膠體層中，有可能引起溶血，除急診外普通生化檢查在血液*凝固后離心效果交好。由于缺乏經(jīng)驗，這種現(xiàn)象在實驗室初始使用分離膠凝采血管時經(jīng)常發(fā)生，如果有纖維蛋白絲停留于血清中很容易阻塞自動分析儀采血針。目前許多國產(chǎn)分離膠質(zhì)量已達到或接近水平，許多醫(yī)院的使用表明和美國BD公司等同類產(chǎn)品的分離時間，分離效果幾乎沒有區(qū)別。經(jīng)用國產(chǎn)（友利）分離膠塑料試管，對生化、免疫30多個項目是否影響測定值作了調(diào)查，用普通玻璃試管做對照并和美國BD公司同類產(chǎn)品進行比較實驗研究，兩者之間具有很好的可比性，結果無顯著性差異（均p>0.05）。
5. 血液與抗凝劑的比例必須，抗凝劑在血標本中的含量可改變血漿中鈣離子濃度進而影響實驗結果。鈣的濃度越高，PT、APTT凝固時間越短。關于凝血試驗真空管“死腔”問題，有實驗表明真空管死腔會產(chǎn)生血小板活性增強（PF4活性增強）、APTT縮短現(xiàn)象的原因可能是多方面的，由于死腔激活血小板是隨機偶然事件，目前尚未對其發(fā)生機理和概率有明確的認識。因此，在進行血小板功能試驗及監(jiān)測APTT以指導肝素抗凝治療時對實驗結果產(chǎn)生的偏差。
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