膠體金免疫層析法檢測呋喃妥因檢測試劑盒

膠體金免疫層析法檢測呋喃妥因檢測試劑盒

 1 原理及用途

本產(chǎn)品應(yīng)用競爭抑制膠體金免疫層析的原理制成，用于檢測蜂蜜、組織、肝臟等樣本中的呋喃妥因代謝物（AHD）。

樣本溶液滴入檢測卡的加樣孔后，樣本溶液中的呋喃妥因代謝物與金標(biāo)抗體相結(jié)合，從而阻止金標(biāo)抗體與纖維素膜上呋喃妥因偶聯(lián)物結(jié)合。當(dāng)樣本溶液中的呋喃妥因代謝物含量大于檢測*檢測線不顯色，結(jié)果為陽性；當(dāng)樣本溶液中呋喃妥因代謝物含量小于檢測*檢測線顯紫紅色，結(jié)果為陰性。

2 技術(shù)指標(biāo)

2.1 試劑卡靈敏度：1ppb（ng/ml）

    對樣本的zui終檢測限須以試劑卡靈敏度乘以樣本處理的稀釋比例。

2.2 樣本檢測下限：

蜂蜜、組織、腸衣、肝臟………………………0.5ppb

3 試劑盒組成

檢測卡……………………50個(gè)/盒

樣本復(fù)溶液……………………1瓶

衍生化試劑……………………3瓶

說明書…………………………1份

4 需要的器材和試劑

4.1 儀器：均質(zhì)器 、氮?dú)獯蹈裳b置、振蕩器、離心機(jī)、刻度移液管、天平（感量0.01g）

4.2 微量移液器：單道20µl-200µl，100µl-1000µl

4.3試劑：乙酸乙酯、正己烷、*、濃HCl、K₂HPO₄·3H₂O

5 樣本前處理

5.1 樣本處理前須知：

實(shí)驗(yàn)器具必須潔凈并使用一次性吸頭，以避免污染干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

5.2 配液：

配液1：0.5M  K₂HPO₄ 溶液

    稱11.4g K₂HPO_4?3H₂O加去離子水溶解定溶至100ml。

配液2：1M  HCL

    8.6mL濃HCL加去離子水定容至100mL。

配液3：1M  NaOH溶液

    稱取4g NaOH，加去離子水定容至100ml

5.3蜂蜜、組織、腸衣、肝臟樣本處理方法

1）稱取2±0.05g均質(zhì)樣本于離心管中，加入4ml去離子水、0.5 ml 1M 鹽酸溶液和600μl衍生化試劑，振蕩5分鐘；

2）65℃水浴孵育30分鐘；

3）分別加入1ml 0.5M K2HPO4 溶液，0.4ml 1M NaOH溶液和5ml的乙酸乙酯，振蕩5分鐘；

4）室溫下4000轉(zhuǎn)/分，離心5分鐘；

5）取出2.5ml的上層液到另一個(gè)離心管中，50-60℃氮?dú)饣蚩諝獯蹈桑?/span>

6）用1ml正已烷溶解殘留物，加入0.5ml復(fù)溶液充分振蕩混合30秒；室溫4000轉(zhuǎn)/分，離心5分鐘；

7）上層為正已烷，取下層樣本液用于分析。

濃縮倍數(shù)為：2    檢測下限：0.5ppb

6 實(shí)驗(yàn)步驟

6.1 撕開檢測卡鋁箔包裝袋，取出檢測卡，放于平整、潔凈的臺(tái)面上。

6.2 用配套吸管吸取已準(zhǔn)備好的樣本液體，緩慢、逐滴的（應(yīng)避免泡沫產(chǎn)生）滴加2-3滴（約60ul）到加樣孔（S）內(nèi)。

6.3 室溫下放置8-10分鐘判斷結(jié)果。超過10分鐘的結(jié)果只能作為參考。

7 結(jié)果判斷

陰性（-）：C線、T線均顯紅色，表示樣本中呋喃妥因濃度低于檢測下限，或不含有。

陽性（+）：C線顯紅色，T線不顯色，則表示樣本中呋喃妥因濃度高于檢測下限。

無效：未出現(xiàn)質(zhì)控C線，表明操作過程不正確或檢測卡已失效。