摘要

在無菌藥品包裝系統(tǒng)的質(zhì)量控制中，密封完整性是確保藥品無菌安全的重要指標。微生物挑戰(zhàn)法作為一種通過微生物侵入驗證包裝系統(tǒng)完整性的檢測手段，在制藥行業(yè)應(yīng)用時間較長。2024年國家藥典委員會發(fā)布的《9628 無菌藥品包裝系統(tǒng)密封性指導(dǎo)原則（第二次）》中，對侵沒式微生物挑戰(zhàn)法的試驗方法、條件及驗證要求進行了系統(tǒng)性說明。本文結(jié)合相關(guān)標準要求，對微生物挑戰(zhàn)法密封性檢測的試驗原理、實施流程及關(guān)鍵參數(shù)進行介紹，并結(jié)合三泉中石MFY-HS微生物挑戰(zhàn)法密封儀的應(yīng)用特點，闡述其在藥品包裝密封性研究中的實際應(yīng)用價值。

關(guān)鍵詞

微生物挑戰(zhàn)法密封儀；包裝密封完整性；無菌藥品包裝系統(tǒng)；9628指導(dǎo)原則；三泉中石MFY-HS

試驗意義

無菌藥品在生產(chǎn)、運輸及儲存過程中需要依賴包裝系統(tǒng)維持其無菌狀態(tài)。一旦包裝密封結(jié)構(gòu)存在微小泄漏，外界微生物便可能通過泄漏路徑進入包裝內(nèi)部，從而影響藥品質(zhì)量甚至安全性。

在《9628 無菌藥品包裝系統(tǒng)密封性指導(dǎo)原則（第二次）》中，密封完整性檢測被明確為保障無菌藥品質(zhì)量的重要環(huán)節(jié)。其中附錄7提出了侵沒式微生物挑戰(zhàn)試驗方法，通過模擬微生物在壓差環(huán)境下進入包裝內(nèi)部的過程，對包裝系統(tǒng)的密封性能進行驗證。該方法能夠直接反映微生物侵入風(fēng)險，因此在藥品包裝密封性研究與驗證中具有重要意義。

試驗設(shè)備

微生物挑戰(zhàn)試驗可采用三泉中石研發(fā)的 MFY-HS微生物挑戰(zhàn)法密封儀 完成。該設(shè)備可在試驗過程中提供穩(wěn)定的負壓與正壓環(huán)境，用于模擬運輸、儲存等過程中可能出現(xiàn)的壓力變化條件。

MFY-HS可實現(xiàn)抽真空與加壓兩種測試模式，并通過專用固定裝置對試驗樣品進行穩(wěn)定固定。例如在預(yù)灌封注射器試驗中，可固定其可移動部件；在柔性包裝試驗中，可限制包裝膨脹變形，以保持密封結(jié)構(gòu)受力條件的一致性。

試驗依據(jù)

微生物挑戰(zhàn)法相關(guān)試驗可參考以下標準或技術(shù)文件：

• 《9628 無菌藥品包裝系統(tǒng)密封性指導(dǎo)原則（第二次）》

• USP<1207.2>包裝完整性評價

• ASTM D6653 / ASTM D6653M 包裝運輸壓力差模擬試驗方法

這些標準對試驗菌種選擇、培養(yǎng)基使用、壓力條件、試驗時間以及結(jié)果判定等方面均提出了技術(shù)要求。

試驗原理

微生物挑戰(zhàn)法（侵沒式）是通過將試驗樣品浸沒在含有微生物的培養(yǎng)基中，并在一定的壓力差條件下觀察微生物是否進入包裝內(nèi)部，從而判斷包裝系統(tǒng)密封性能的一種方法。

在試驗過程中：

1. 將樣品浸入含微生物的培養(yǎng)基中。

2. 通過設(shè)備產(chǎn)生真空或正壓，使包裝內(nèi)外形成壓差。

3. 壓差作用下若包裝存在泄漏通道，培養(yǎng)基中的微生物可能進入包裝內(nèi)部。

4. 試驗結(jié)束后通過培養(yǎng)觀察是否出現(xiàn)微生物生長，從而判定是否發(fā)生泄漏。

壓力差的作用不僅能夠模擬運輸過程中的環(huán)境變化，還可以幫助排除殘留空氣，使培養(yǎng)基更容易接觸潛在泄漏通道。

適用范圍

侵沒式微生物挑戰(zhàn)法適用于多種藥品及醫(yī)療器械包裝結(jié)構(gòu)，例如：

• 輸液軟袋等柔性包裝

• 泡罩包裝

• 預(yù)灌封注射器

• 口服固體藥瓶

• 口服液體瓶

• 注射劑瓶

• 塑料瓶與軟管包裝

需要注意的是，包裝材料必須能夠耐受培養(yǎng)基浸泡及試驗壓力條件，且試驗過程中包裝結(jié)構(gòu)不應(yīng)發(fā)生改變。

取樣準備

試驗前需對樣品進行規(guī)范準備，主要包括以下步驟：

1. 樣品選擇
   選取具有代表性的完整包裝樣品。

2. 外觀檢查
   確保樣品無明顯破損或外觀缺陷。

3. 樣品固定
   對柔性包裝或具有活動部件的包裝，利用專用固定裝置限制其膨脹或移動。

4. 培養(yǎng)基準備
   根據(jù)試驗要求配置含目標微生物的培養(yǎng)基。

5. 設(shè)備參數(shù)設(shè)置
   根據(jù)試驗方案設(shè)置真空度、壓力值、保持時間等參數(shù)。

試驗過程

1. 將試驗樣品安裝在微生物挑戰(zhàn)法密封儀的試驗腔內(nèi)，并進行固定。

2. 在試驗腔中加入含微生物的培養(yǎng)基，使樣品浸沒。

3. 設(shè)置試驗壓力條件，例如負壓或正壓循環(huán)。

4. 啟動設(shè)備，設(shè)備自動完成抽真空、保壓及壓力變化過程。

5. 在設(shè)定時間內(nèi)保持壓差條件，使培養(yǎng)基充分接觸潛在泄漏點。

6. 試驗結(jié)束后取出樣品并進行培養(yǎng)觀察。

7. 根據(jù)是否出現(xiàn)微生物生長判斷包裝系統(tǒng)是否存在泄漏。

在部分研究中，還可結(jié)合統(tǒng)計方法分析不同孔徑下微生物侵入概率，從而評估包裝系統(tǒng)的最大允許泄漏限度。

設(shè)備優(yōu)勢

三泉中石 MFY-HS微生物挑戰(zhàn)法密封儀 在藥品包裝密封性研究中具有以下特點：

• 設(shè)備支持正壓與負壓兩種試驗?zāi)Ｊ?/p>

• 具備自動恒壓補氣功能，保證壓力穩(wěn)定

• 試驗曲線可實時顯示，便于觀察測試過程

• 多配方存儲功能，方便不同試驗條件調(diào)用

• 數(shù)據(jù)自動存儲并具備掉電記憶功能

• 支持RS232接口，可連接實驗室信息管理系統(tǒng)（LIMS）

• 軟件支持在線升級，便于系統(tǒng)維護與功能擴展

• 數(shù)據(jù)管理符合GMP對可追溯性的要求

結(jié)論

微生物挑戰(zhàn)法能夠通過微生物侵入驗證包裝系統(tǒng)密封完整性，是無菌藥品包裝研究中的重要檢測手段?！?628 無菌藥品包裝系統(tǒng)密封性指導(dǎo)原則（第二次）》對該方法的試驗流程及驗證要求進行了詳細規(guī)定，為制藥企業(yè)開展密封完整性研究提供了技術(shù)依據(jù)。

在實際應(yīng)用中，通過三泉中石MFY-HS微生物挑戰(zhàn)法密封儀可實現(xiàn)穩(wěn)定的壓差環(huán)境控制，并配合專用固定裝置滿足不同包裝結(jié)構(gòu)的試驗需求。同時，結(jié)合真空衰減法等其他檢測技術(shù)開展對比研究，可進一步確定包裝系統(tǒng)的最大允許泄漏限度，為藥品包裝安全性評估提供可靠數(shù)據(jù)支持。