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凝膠過濾色譜：
一般來講，凝膠過濾色譜的結(jié)果好壞直接取決于凝膠柱的柱效，而影響柱效的因素有：
凝膠本身性質(zhì)：
每一種凝膠均有其合適的分離范圍，應(yīng)選擇合適的凝膠進(jìn)行分離。同樣分離范圍的凝膠顆粒越細(xì)的，柱效越高。
色譜柱裝填的好壞：
凝膠過濾色譜柱裝填完后，一般可以用丙酮（或NaCl）測定柱效和峰對稱性，一般對于平均顆粒直徑在30~34微米的Superose PG、Superdex PG系列凝膠，柱效應(yīng)在9000以上，而顆粒平均直徑在90微米的Sepharose FF凝膠柱效應(yīng)在3000以上。通常，越是分辨率高的細(xì)顆粒凝膠對于裝柱的技術(shù)要求越高。
除了柱效以外，影響分離的因素主要有：
1、色譜柱的長短，一般較長的柱分離較好，L/D>20.但一般商用色譜空柱長100cm左右，zui多可以裝到90~95cm高左右，如果仍不能取得滿意的分辨率，可以用兩根相同的凝膠柱，用SRTC-2接頭連接后，可以提高分辨率40%.
分離度正比于柱長的平方根。
2、樣品濃度，在蛋白濃度小于50mg/ml并且粘度小于5cP（厘泊）的條件下，樣品濃度對于分辨率影響較小。
3、上樣體積：
上樣體積越小分辨越好，不同的凝膠具有不同的推薦上樣體積，如下：
凝膠類型 推薦上樣體積（%Vt）
Sephadex 2-5%
Sepharose 2-5%
Sephacryl HR 1-2%
Superdex PG 1-2%
Superose PG 1-2%
Superdex 0.5%
Superose 0.5%
對于利用Sephadex G25進(jìn)行蛋白質(zhì)脫鹽的特殊情形，樣品量達(dá)到柱體積的25%仍可以保證蛋白與鹽分開。
4、洗脫流速：
一般較低的流速下（5~10cm/h）分辨率較高，但Superdex PG,Sepharose FF等新型凝膠可以在較高的流速下分離而不致?lián)p失分離度。

注：本文色譜的主要影響因素屬于蛋白質(zhì)純化文章，主要介紹色譜方面的知識，內(nèi)容僅供學(xué)習(xí)交流與參考.