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川芎不同入藥形式的體外溶出與藥效學(xué)比較

發(fā)布時間:2011-08-05

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  川芎為臨床常用中藥,具有活血行氣、祛風(fēng)止痛的功效,主要用于月經(jīng)不調(diào)、經(jīng)閉痛經(jīng)、頭痛、風(fēng)濕痹痛等癥〔1〕。其成方制劑以治療疼痛癥較多。目前多應(yīng)用全粉入藥或水、醇等提取入藥。為探討其科學(xué)合理的用藥形式,我們通過體外溶出試驗,比較了川芎超微粉、細(xì)粉兩種粉碎工藝及水提、醇提和雙提3種提取工藝中阿魏酸的體外溶出量,并進(jìn)行了鎮(zhèn)痛作用的藥效學(xué)比較試驗,結(jié)果超微粉和醇提物阿魏酸的溶出量多,鎮(zhèn)痛作用強(qiáng)。說明川芎的正確入藥形式為:若以全粉入藥,超微粉較細(xì)粉更能增加有效成分的溶出,提高藥效。若要減少劑量用藥,則以川芎醇提物入藥為好。
  
  1實驗材料
  
  1.1儀器
  
  939型薄層自動鋪板器(重慶南岸貝爾德儀器技術(shù)廠);智能溶出試驗儀(天津大學(xué)無線電廠);CS-9301
  
  薄層掃描儀(日本島津);82-1型離心機(jī)(上海醫(yī)療器械廠)。
  
  1.2藥材
  
  川芎藥材購自濟(jì)南建聯(lián)中藥店,經(jīng)山東省中醫(yī)藥研究所生藥室鑒定為傘型科植物川芎Ligus-ticumChuanxiongHoort.的干燥根莖。
  
  1.3試劑
  
  所用試劑均勻為分析純;阿魏酸對照品(中國藥品生物制品檢定所)。
  
  1.4動物
  
  昆明種小鼠,♀♂共用,體重18~22g、24~26g,由山東中醫(yī)藥大學(xué)動物實驗中心提供。
  
  2方法和結(jié)果
  
  2.1樣品制備
  
  2.1.1川芎細(xì)粉將川芎粉碎成全部通過六號篩的粉末。
  
  2.1.2川芎微粉將川芎超微粉碎成中心粒徑10?m以下不少于95%的微粉。
  
  2.1.3川芎水提物取川芎藥材粉碎成粗粉。稱取50g,加水煎煮兩次,第1次10倍量水2h,第2次8倍量水1h,濾過,合并濾液,減壓濃縮至稠膏,真空干燥,得干膏18.1g。
  
  2.1.4川芎醇提物取川芎藥材粉碎成粗粉,稱取50g,加80%乙醇提取2次,每次8倍量,每次2h,濾過,合并濾液,減壓回收乙醇并濃縮至稠膏,真空干燥,得干膏12.0g。
  
  2.1.5川芎雙提物取川芎藥材粉碎成粗粉,稱取50g,加水提取揮發(fā)油至盡,收集揮發(fā)油,提取液濾過,藥渣加水煎煮1h,濾過,合并濾液,減壓濃縮成稠膏,真空干燥,得干膏20.2g。
  
  2.2溶出液制備
  
  調(diào)節(jié)溶出儀水浴為37℃恒溫,精密量取1000mL人工胃液置溶出儀的燒杯中,于恒溫水浴中保溫,攪拌轉(zhuǎn)速設(shè)為100r·min-1。取粉碎樣品,分別精密稱定重量(細(xì)粉、超微粉稱取約3g,提取物稱取相當(dāng)于原藥材3g的干膏量)每組3份,置測定儀的燒杯中,人工胃液接觸到樣品時開始計時,1h后,取出液體,2000r·min-1離心20min。取上清液經(jīng)濾膜過濾,即得供試溶出液。
  
  2.3阿魏酸含量測定
  
  2.3.1薄層層析及掃描條件取硅膠G,加0.2%的CMC-Na,自動鋪板器鋪成10cm×20cm×0.03cm的薄層板,105℃活化30min后置干燥器中保存,冷卻后備用。正已烷-氯仿-冰醋酸(8:8:1)展開,展距8cm,雙波長反射式鋸齒掃描,λs=328nm,λR=370nm。
  
  2.3.2標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制精密稱取阿魏酸對照品約1mg,以甲醇溶解,轉(zhuǎn)移至2mL量瓶中,加甲醇并稀釋至刻度搖勻,作為對照品溶液。精密吸取1,2,3,4,5?L點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上,按上述條件展開,取出、晾干,置紫外光下365nm處檢視,定位,測定,結(jié)果表明阿魏酸在0.5~2.5?g之間上樣量與斑點(diǎn)峰面積積分值呈線形關(guān)系,回歸方程為Y=1124.68X+273.21,r=0.9992。
  
  2.3.3樣品測定精密吸取溶出液50mL,乙醚提取3次,每次50mL合并乙醚液,揮干,殘渣用甲醇溶解,定容于2mL量瓶中,作為供試品溶液。精密吸取供試品溶液10?L,對照品溶液1?L和5?L點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上,依法測定,測定結(jié)果見表1。(川芎原藥材中阿魏酸的含量為0.0314%)。
  
  2.4川芎不同粉碎度的鎮(zhèn)痛作用
  
  2.4.1對0.6%醋酸扭體法的鎮(zhèn)痛作用比較♂小鼠60只,體重24~26g,按體重隨機(jī)分為3組,分別給于各藥物組灌胃,1次/日,連續(xù)3日,對照組給等體積的蒸餾水灌胃,末次給藥后30min,逐只腹腔注射0.6%醋酸(0.1mL/10g鼠重),觀察注射后出現(xiàn)*次扭體反應(yīng)的時間及15min內(nèi)的扭體次數(shù),并進(jìn)行組間統(tǒng)計學(xué)處理,結(jié)果見表2。
  
  2.4.2對小鼠熱板法鎮(zhèn)痛作用比較雌性小鼠60只,體重18~20g,實驗前預(yù)篩痛閾,以痛閾值大于5s,小于30s者為合格,而后隨機(jī)分為3組,分別給藥同2.4.1項,按熱板法〔2〕測定其痛閾值,進(jìn)行組間t檢驗。
  
  3小結(jié)和討論
  
  實驗結(jié)果表明,川芎的不同粉碎及提取工藝中,超微粉及醇提物中有效成分阿魏酸的溶出量較高,鎮(zhèn)痛作用也較強(qiáng)。據(jù)文獻(xiàn)報道,川芎揮發(fā)油中主要成分藁本內(nèi)酯有拮抗子宮收縮的作用〔3〕。有機(jī)酸類成分阿魏酸有抗炎和鎮(zhèn)痛作用〔4〕,但受熱易破壞,在川芎水提和雙提工藝中,因為高溫和長時間的加熱,阿魏酸大量損失。川芎超微粉因藥材細(xì)胞已破壁,更有利于有效成分的溶出,故川芎超微粉與醇提物阿魏酸的溶出量較多,鎮(zhèn)痛作用也較強(qiáng)。另外,其生物堿川芎嗪可較多的透過血腦屏障,是藥效成分之一〔5〕。但此成分極易受熱破壞,經(jīng)過加熱提取及濃縮過程已損失殆盡〔6〕。因沒有購到川芎嗪的對照品,此部分工作尚需補(bǔ)充。
  
  通過本次實驗可以看出,川芎醇提取中阿魏酸的溶出量僅次于超微粉,而鎮(zhèn)痛實驗也證實醇提法強(qiáng)于水提法及雙提法,僅次于超微粉及細(xì)粉。綜合考慮,我們認(rèn)為在劑型允許原藥材粉入藥的情況下,如散劑、蜜丸等,川芎的入藥形式以超微粉為好,但若為液體制劑或需減少服用劑量的劑型,如滴丸等,川芎入藥形式還是以醇提物為好。
  
  超微細(xì)粉化技術(shù)近年來應(yīng)用于中藥的研究報道逐漸增多,它是利用振動對物料進(jìn)行壓縮式粉碎,可將以傳統(tǒng)粉碎工藝得到的原生藥粉末的粒度從150~200目(75μm以下),提高到中心粒徑5~10μm以下,以達(dá)到細(xì)胞破壁的目的。這種新技術(shù)不僅可以全成分保留活性物質(zhì),而且可以使藥材中的有效成分直接暴露出來,從而使藥物吸收更加迅速、*〔7〕。中藥有效成分的溶出與藥物在體內(nèi)的生物利用度之間存在著一定的相關(guān)性〔8,9〕。綜合本研究實驗結(jié)果可以看出,川芎超細(xì)微粉化入藥或進(jìn)行方劑的制劑工藝研究,是相對合理科學(xué)的。本研究亦為中藥的超細(xì)微粉化研究提供了一個新的思路。
  
  參考文獻(xiàn):
  
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