三、微生物限度

1. 包裝材料的大腸埃希菌檢查？

答：根據(jù)包裝材料的不同，大腸埃希菌的檢查方法大致有兩種，一種是將浸提液合并后，取一部分，接種膽鹽乳糖培養(yǎng)基進(jìn)行檢查；另一種是將浸提液合并后，薄膜過濾，然后按規(guī)定的方法檢驗。

2. 抗真菌藥品的微生物限度檢查法

答：這類產(chǎn)品的霉菌和酵母菌計數(shù)方法需要進(jìn)行調(diào)整，可以根據(jù)產(chǎn)品劑型的不同，選擇薄膜過濾法或培養(yǎng)基稀釋法等方法。

3. 為什么在日常樣品檢測中還需要做陽性對照（國外不需要）？

答：為了確保每一次檢測對可能存在的微生物都是有效的。

4. 對于同一個品種，藥典為什么不規(guī)定統(tǒng)一的檢測方法？

答：本版藥典進(jìn)行過這樣的嘗試，也有某些品種已經(jīng)收載了統(tǒng)一的檢測方法，如注射用頭孢類抗生素的無菌檢查。之所以沒有大量收載，主要是由于檢測方法還沒有經(jīng)過必要的復(fù)核。將微生物檢驗的統(tǒng)一方法收載在品種的各論項下，始終是努力的方向。

5. 梭菌檢查中需置厭氧條件下培養(yǎng)48小時，是否指在厭氧培養(yǎng)箱中？

答：需要在厭氧培養(yǎng)裝置中進(jìn)行培養(yǎng)，未必一定是厭氧培養(yǎng)箱。

6. 控制菌檢查方法驗證時，采用多種方法均未檢出控制菌，如何處理？

答：在確保所使用的各種方法都沒有錯誤的情況下，如果仍無法使試驗菌生長，則應(yīng)該采用薄膜過濾法進(jìn)行檢查。理由是該方法能夠zui大程度地去除產(chǎn)品的抑菌作用。

7.常規(guī)的監(jiān)督抽樣檢品（包括原料）在進(jìn)行微生物限度檢查時，是否一定要進(jìn)行活螨檢查并在原始記錄與報告書中體現(xiàn)？

答：需要進(jìn)行檢查?？梢栽谠加涗浿畜w現(xiàn)，報告書上可以不出現(xiàn)，除非當(dāng)發(fā)現(xiàn)有活螨檢出。

8. 藥包材微生物限度檢查規(guī)定了合格質(zhì)量水平，通常產(chǎn)量下取樣8個，要求8個瓶子均符合規(guī)定，如何進(jìn)行？

答：每個瓶子分別進(jìn)行實驗。

9. 大腸埃希菌具體操作規(guī)程？

答：參見中國藥品檢驗標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程。

10. 動物組織及動物類原藥材的提取物入藥，是否需要檢沙門菌？

答：需要進(jìn)行沙門菌檢查。

11. 關(guān)于中國藥典菌落計數(shù)結(jié)果的判斷還存在疑義，望能舉例說明。

答：不清楚所指的存在疑義是指哪方面。2010年版對結(jié)果報告進(jìn)行了較大篇幅的修訂，目前的規(guī)定應(yīng)該比05版更為清晰、明確。

12. 需做沙門菌檢驗樣品量的確定？

答：10g（ml）用于樣品計數(shù)檢驗和其他控制菌檢查，10g（ml）用于沙門菌檢查，10g（ml）用于沙門菌檢查的陽性對照。需要進(jìn)行沙門菌檢查的樣品，檢驗用量應(yīng)為30g（ml）。

13. 日常的實驗室裝備能否達(dá)到梭菌無氧的培養(yǎng)要求？

答：*可以?？梢圆捎脜捬跖囵B(yǎng)盒（罐）。

14. 如果一個產(chǎn)品有兩個規(guī)格，是否可以取其中之一做陽性對照？

答：每個規(guī)格均需進(jìn)行陽性對照。

15. 細(xì)菌數(shù)為100g/g的，樣品稀釋級只做1:10,1:100的倍數(shù)就可以了嗎？

答：可以。

16. 培養(yǎng)時間3天，5天，可理解為72小時，120小時嗎？

答：可以。這樣更為嚴(yán)謹(jǐn)。

17.中國藥品檢驗標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)范“已做驗證試驗的供試品，在檢查時刻不必再做陽性對照”如何理解？

答：該標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)范中在無菌檢查法中規(guī)定“供試品無菌檢查應(yīng)進(jìn)行陽性對照試驗”，表明不論是否進(jìn)行了方法驗證，在產(chǎn)品的每一次檢驗過程中，還必須進(jìn)行陽性對照。在控制菌檢查的大腸埃希菌項下，指出“已做驗證試驗的供試品，在該供試品檢查時不必再作陽性對照”。該規(guī)定僅適用方法驗證與供試品檢查同時開展的情況。2005年版藥典和2010年版藥典在控制菌檢查中均對陽性對照試驗有明確規(guī)定，“進(jìn)行供試品控制菌檢查時，應(yīng)做陽性對照試驗。”產(chǎn)品檢驗中應(yīng)以藥典規(guī)定為準(zhǔn)。

18. 無菌檢查和微生物限度檢查中，產(chǎn)品中規(guī)定的溶解液是否可以換成其他的溶液？

答：可以。

19. 制劑通則中，沒有微生物檢查項目的，是否可不進(jìn)行微生物項目檢測？

答：可以。主要是二部制劑通則中口服片劑、膠囊劑、丸劑和顆粒劑。

20. 在細(xì)菌、霉菌和酵母菌計數(shù)中，適用性檢查細(xì)菌是培養(yǎng)48小時，霉菌和酵母菌是培養(yǎng)72小時，供試品檢查中細(xì)菌是培養(yǎng)3天，霉菌和酵母菌是培養(yǎng)5天，那方法驗證中應(yīng)參照哪個時間進(jìn)行培養(yǎng)。

答：應(yīng)按照供試品檢驗時的條件，即細(xì)菌3天，霉菌和酵母菌5天。

21. 測定純化水微生物限度時，每張濾膜過濾量是多少合適？需要先稀釋嗎？過濾完后需不需要沖洗？假如我取10ml純化水通過雙杯體封閉式薄膜過濾器過濾，每張濾膜上的計數(shù)是以5ml為單位還是10ml為單位？

答：過濾量應(yīng)以培養(yǎng)后出現(xiàn)的微生物數(shù)不超過100cfu/膜為標(biāo)準(zhǔn)。一般可不稀釋。不需要沖洗。每張濾膜的過濾量為5ml。