針對(duì)含余氯水樣，可選用泰林無(wú)菌取水袋或無(wú)菌取樣瓶，兩類(lèi)產(chǎn)品均按照 GB/T 5750.2-2023《生活飲用水標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)方法 第 2 部分：水樣的采集與保存》的相關(guān)要求添加硫代硫酸鈉，可有效去除水樣中的余氯。若使用泰林未添加硫代硫酸鈉的無(wú)菌取水袋、無(wú)菌取樣瓶，建議對(duì)含余氯水樣先行預(yù)處理。

2.重金屬離子含量高的水樣為什么要進(jìn)行預(yù)處理？

重金屬離子會(huì)改變酶底物試劑體系的離子強(qiáng)度與pH值，直接抑制目標(biāo)微生物體內(nèi)酶的活性，導(dǎo)致其無(wú)法與酶底物充分反應(yīng)。部分重金屬離子與顯色劑或反應(yīng)產(chǎn)物結(jié)合，產(chǎn)生沉淀影響判讀，造成檢測(cè)結(jié)果偏低。

根據(jù)HJ 1001-2018《水質(zhì) 總大腸菌群、糞大腸菌群和大腸埃希氏菌的測(cè)定 酶底物法》與HJ 347.2-2018《水質(zhì) 糞大腸菌群的測(cè)定 多管發(fā)酵法》規(guī)定：如果采集的是重金屬離子含量高的水樣，應(yīng)在每100mL水樣中添加0.036g乙二胺四乙酸二鈉。

1.酶底物法大腸菌群檢測(cè)出現(xiàn)淺色孔的原因、處理方法與檢測(cè)結(jié)果判讀？

答：酶底物法大腸菌群檢測(cè)出現(xiàn)淺色孔的原因有：

1）水體中的部分大腸菌群自身生長(zhǎng)慢、產(chǎn)酶少。

2）環(huán)境壓力造成部分大腸菌群菌體處于損傷狀態(tài)。

根據(jù)GB/T 5750.12-2023 《生活飲用水標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)方法 第12部分：微生物指標(biāo)》總大腸菌群檢測(cè)酶底物法規(guī)定：如果結(jié)果為可疑陽(yáng)性，可延長(zhǎng)培養(yǎng)時(shí)間到28h進(jìn)行結(jié)果判讀。

培養(yǎng)時(shí)間小于 24h出現(xiàn)的陽(yáng)性結(jié)果視作有效，培養(yǎng)時(shí)間高于28h的陰性結(jié)果也視為有效。

24-28h內(nèi)出現(xiàn)的結(jié)果變化以 28h最終結(jié)果為有效結(jié)果，28h后出現(xiàn)的結(jié)果變化均視為無(wú)效。

2. 酶底物法大腸菌群檢測(cè)出現(xiàn)可疑陽(yáng)性孔、為什么可以延長(zhǎng)培養(yǎng)時(shí)間至28h觀察結(jié)果？

答：延長(zhǎng)培養(yǎng)時(shí)間至28h，是對(duì)24h可疑陽(yáng)性結(jié)果的補(bǔ)充確認(rèn)。如果24h已出現(xiàn)明確陽(yáng)性，則不需延長(zhǎng)培養(yǎng)。只有存在難以辨認(rèn)的可疑陽(yáng)性結(jié)果，需延長(zhǎng)培養(yǎng)時(shí)間至28h。

對(duì)大腸菌群：28h是一個(gè)經(jīng)過(guò)驗(yàn)證的、能充分促進(jìn)絕大多數(shù)受到環(huán)境壓力而菌體損傷的大腸菌群恢復(fù)的窗口期。

對(duì)于非大腸菌群：28h是一個(gè)安全邊界，可以確保抑菌成分的有效性，最大限度地防止非大腸菌群的生長(zhǎng)，從而保證方法的高特異性。

3. 為什么糞大腸菌群檢測(cè)時(shí)，定量盤(pán)中會(huì)出現(xiàn)漸變黃色？

答：因?yàn)榕囵B(yǎng)箱加熱方式、定量盤(pán)擺放與堆疊方式造成定量盤(pán)受熱不均，影響糞大腸菌群的生長(zhǎng)。

定量盤(pán)擺放與堆疊方式造成箱體內(nèi)熱傳遞更慢，熱分布更不均勻。糞大腸菌群作為溫度敏感型細(xì)菌，在溫度低的一側(cè)生長(zhǎng)產(chǎn)酶變色，在溫度高的一側(cè)（如超出了44.5 ± 0.5℃的上限），生長(zhǎng)被抑制，出現(xiàn)如下圖所示的漸變色。

集中存放→雙層生物安全滅菌袋→121°C、高壓蒸汽滅菌20min

依據(jù)GB 19489-2008 《實(shí)驗(yàn)室生物安全通用要求》；SN/T 4835-2017 《實(shí)驗(yàn)室生物廢棄物管理要求》；HJ 1001-2018 《水質(zhì) 總大腸菌群、糞大腸菌群和大腸埃希氏菌的測(cè)定 酶底物法》相關(guān)規(guī)定。