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三環(huán)抗抑郁劑固相萃取凈化方法

1. 樣品制備

A . 血漿或血清

用 1.0mol/L KOH 溶液調(diào)節(jié) pH 值至 6.0 ± 0.5 1mL 血漿或血清中加入 4mL 100mmol/L磷酸鹽緩沖液（ pH6.0 充分混合。

B. 全血

充分混合，1mL 血液中加入 2mL 甲醇。離心去除蛋白沉淀；

加入 10mL 100mmol/L 磷酸鹽緩沖液（ pH6.0 充分混合，取上清液。將用 1.0mol/L KOH 溶液調(diào)節(jié)pH 值至 6.0 ± 0.5

2. SPE 凈化

2mL 去離子水和 1mL 100mmol/L 磷酸鹽緩沖液（ pH6.0 分別沖洗柱床； a. 活化：用 2mL 甲醇。

注意：要保證吸附劑不干燥；

b. 上樣：上樣流速控制在 1~2mL/min

1mL1.0mol/L 醋酸和 3mL 甲醇分別淋洗，c. 淋洗：分別用 3mL 去離子水。zui后將 SPE 柱抽 5min至干燥；

d. 洗脫：用 2mL 二氯甲烷 / 異丙醇 / 氨水（ 78:20:2 以 1~2mL/min 速度進(jìn)行洗脫。收集全部洗脫液；

注意：洗脫液必需為當(dāng)天新制備的新鮮溶液。

3. 蒸發(fā)干燥

將洗脫液在 40 ℃ 以下旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至干

4. 檢測(cè)方法

GC-NPD 或者 GC-MS 分析

衍生化

70 ℃ 反應(yīng) 20min 冷卻至室溫，用 50 μ L 乙酸乙酯溶解蒸發(fā)后的樣品 加入 50 μ L 五氟丙酰酸酐（ PFPA充氮?dú)獠⒚芊狻Ｕ舭l(fā)至干； 100 μ L 乙酸乙酯定容

非衍生化方法

用 100 μ L 甲醇重新定容；進(jìn) 1~ 3 μ L 測(cè)定； 沒(méi)有衍生化的樣品也可以直接進(jìn)行分析。

LC 檢測(cè)

用 200 μ L 乙腈 / 去離子水（ 25:75 定容，將第 3 步中的樣品。用漩渦混合器混合 30 進(jìn) 100 μ L測(cè)定。

5. 樣品成分

三環(huán)抗抑郁劑

本方法中使用的固相萃取裝置