【??參數(shù)信息】
英文名稱:AF 532 ConA ;Alexa Fluor 532 Concanavalin A
中文名稱:AF 532刀豆蛋白A,熒光染料AF532標記的刀豆蛋白A
激發(fā)/發(fā)射波長: 495 nm/519 nm
【簡單概述】(熒光染料AF532標記的刀豆蛋白A)
AF 532 ConA 是 Alexa Fluor 532熒光染料與刀豆蛋白A共價結(jié)合形成的復合物 。
ConA 本質(zhì)是一種植物凝集素,分子量約 104 kDa,由 4 個 26 kDa 亞基組成。
特異性結(jié)合 α-D-甘露糖和 α-D-葡萄糖殘基,存在于糖蛋白、糖脂等含糖結(jié)構(gòu)中。
熒光探針,具有高水溶性、細胞通透性及光穩(wěn)定性,適用于活細胞實時成像與動態(tài)追蹤 。
ConA 通過其糖結(jié)合域識別細胞表面的 α-甘露糖/葡萄糖殘基,此過程依賴鈣離子和鎂離子維持活性構(gòu)象 。
AF 532 與 ConA 共價結(jié)合后,保留糖結(jié)合活性,同時賦予熒光特性。
通過熒光顯微鏡或流式細胞術(shù),可實時觀察細胞表面糖基化分布、動態(tài)變化及細胞間相互作用。
T 細胞有絲分裂原:激活 T 細胞,招募淋巴細胞,誘導細胞因子產(chǎn)生。
誘導程序性細胞死亡:通過線粒體介導的凋亡和自噬途徑,觸發(fā)細胞死亡。
激活轉(zhuǎn)錄因子 NFAT:調(diào)控免疫相關(guān)基因表達,影響 T 細胞受體信號。
誘導急性肝損傷:ConA 注射小鼠后,通過 T 細胞介導的免疫反應(yīng)攻擊肝細胞,模擬人類自身免疫性肝炎。
炎癥因子(TNF-α、IL-6)水平升高,導致轉(zhuǎn)氨酶(ALT/AST)釋放 。
AF 532 ConA 標記細胞表面糖蛋白,用于研究 糖基化模式、細胞信號轉(zhuǎn)導及病原體-宿主相互作用。
初始狀態(tài):ConA與糖基聚合物結(jié)合,熒光淬滅。
加入葡萄糖:葡萄糖競爭結(jié)合 ConA,使熒光恢復,實現(xiàn)葡萄糖定量檢測。
固定化 ConA 用于純化含 α-甘露糖/葡萄糖的糖蛋白。
【應(yīng)用領(lǐng)域】
實時追蹤糖基化動態(tài)變化或細胞-基質(zhì)相互作用。
結(jié)合細胞膜糖蛋白,固定細胞或細胞核,用于 CUT&Tag、CUT&RUN 等染色質(zhì)研究技術(shù),避免離心損失;分離特定糖類型的細胞(如干細胞、免疫細胞)。
共聚焦顯微鏡/超分辨顯微鏡(STORM) :利用 AF 532 的高分辨率和光穩(wěn)定性,實現(xiàn)亞細胞結(jié)構(gòu)成像;
多色成像:與其他熒光染料(如 AF 488、AF 594)兼容,同時標記多種靶點;
活細胞動態(tài)追蹤:監(jiān)測糖蛋白分布、內(nèi)吞過程或細胞間相互作用。
【相關(guān)試劑】
AF514 酪胺(XFD514 tyramide)
AF 555胺與Alexa Fluor 555胺的分子相同
AF 568胺與Alexa Fluor 568胺的分子相同
AF 647胺與Alexa Fluor 647胺的分子相同