【??參數(shù)信息】
英文名稱:AF 532 ConA ;Alexa Fluor 532 Concanavalin A
中文名稱:AF 532刀豆蛋白A,熒光染料AF532標(biāo)記的刀豆蛋白A
激發(fā)/發(fā)射波長(zhǎng): 495 nm/519 nm
生產(chǎn)廠商:西安強(qiáng)化生物科技
【簡(jiǎn)單概述】(熒光染料AF532標(biāo)記的刀豆蛋白A)
AF 532 ConA 是 Alexa Fluor 532熒光染料與刀豆蛋白A共價(jià)結(jié)合形成的復(fù)合物 。
ConA 本質(zhì)是一種植物凝集素,分子量約 104 kDa,由 4 個(gè) 26 kDa 亞基組成。
特異性結(jié)合 α-D-甘露糖和 α-D-葡萄糖殘基,存在于糖蛋白、糖脂等含糖結(jié)構(gòu)中。
熒光探針,具有高水溶性、細(xì)胞通透性及光穩(wěn)定性,適用于活細(xì)胞實(shí)時(shí)成像與動(dòng)態(tài)追蹤 。
(一)糖結(jié)合與標(biāo)記機(jī)制
ConA 通過(guò)其糖結(jié)合域識(shí)別細(xì)胞表面的 α-甘露糖/葡萄糖殘基,此過(guò)程依賴鈣離子和鎂離子維持活性構(gòu)象 。
AF 532 與 ConA 共價(jià)結(jié)合后,保留糖結(jié)合活性,同時(shí)賦予熒光特性。
通過(guò)熒光顯微鏡或流式細(xì)胞術(shù),可實(shí)時(shí)觀察細(xì)胞表面糖基化分布、動(dòng)態(tài)變化及細(xì)胞間相互作用。
T 細(xì)胞有絲分裂原:激活 T 細(xì)胞,招募淋巴細(xì)胞,誘導(dǎo)細(xì)胞因子產(chǎn)生。
誘導(dǎo)程序性細(xì)胞死亡:通過(guò)線粒體介導(dǎo)的凋亡和自噬途徑,觸發(fā)細(xì)胞死亡。
激活轉(zhuǎn)錄因子 NFAT:調(diào)控免疫相關(guān)基因表達(dá),影響 T 細(xì)胞受體信號(hào)。
誘導(dǎo)急性肝損傷:ConA 注射小鼠后,通過(guò) T 細(xì)胞介導(dǎo)的免疫反應(yīng)攻擊肝細(xì)胞,模擬人類自身免疫性肝炎。
CD8?T 細(xì)胞通過(guò)穿孔素加劇肝損傷 。
炎癥因子(TNF-α、IL-6)水平升高,導(dǎo)致轉(zhuǎn)氨酶(ALT/AST)釋放 。
AF 532 ConA 標(biāo)記細(xì)胞表面糖蛋白,用于研究 糖基化模式、細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)及病原體-宿主相互作用。
初始狀態(tài):ConA與糖基聚合物結(jié)合,熒光淬滅。
加入葡萄糖:葡萄糖競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合 ConA,使熒光恢復(fù),實(shí)現(xiàn)葡萄糖定量檢測(cè)。
固定化 ConA 用于純化含 α-甘露糖/葡萄糖的糖蛋白。
【應(yīng)用領(lǐng)域】
標(biāo)記活細(xì)胞表面的甘露糖/葡萄糖修飾,用于:
實(shí)時(shí)追蹤糖基化動(dòng)態(tài)變化或細(xì)胞-基質(zhì)相互作用。
結(jié)合細(xì)胞膜糖蛋白,固定細(xì)胞或細(xì)胞核,用于 CUT&Tag、CUT&RUN 等染色質(zhì)研究技術(shù),避免離心損失;分離特定糖類型的細(xì)胞(如干細(xì)胞、免疫細(xì)胞)。
共聚焦顯微鏡/超分辨顯微鏡(STORM) :利用 AF 532 的高分辨率和光穩(wěn)定性,實(shí)現(xiàn)亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)成像;
多色成像:與其他熒光染料(如 AF 488、AF 594)兼容,同時(shí)標(biāo)記多種靶點(diǎn);
活細(xì)胞動(dòng)態(tài)追蹤:監(jiān)測(cè)糖蛋白分布、內(nèi)吞過(guò)程或細(xì)胞間相互作用。
【相關(guān)試劑】
AF514 酪胺(XFD514 tyramide)
AF 555胺與Alexa Fluor 555胺的分子相同
AF 568胺與Alexa Fluor 568胺的分子相同
AF 647胺與Alexa Fluor 647胺的分子相同
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