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西安強化生物科技有限公司


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OverExpress C43(DE3)化學感受態(tài)細胞

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參  考  價:¥500 - ¥15000 /mg
具體成交價以合同協(xié)議為準
  • 產(chǎn)品型號

  • 品牌

    其他品牌

  • 廠商性質(zhì)

    生產(chǎn)商

  • 所在地

    西安市

聯(lián)系方式:李杰查看聯(lián)系方式

更新時間:2025-09-01 08:41:28瀏覽次數(shù):272次

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經(jīng)營模式:生產(chǎn)廠家

商鋪產(chǎn)品:496條

所在地區(qū):陜西西安市

聯(lián)系人:李杰 (經(jīng)理)

產(chǎn)品簡介

OverExpress C43(DE3)化學感受態(tài)細胞,兼容主流表達載體,特別適合膜蛋白與疏水性蛋白的高效生產(chǎn)。操作流程涵蓋解凍、轉(zhuǎn)化至誘導(dǎo)表達,關(guān)鍵步驟強調(diào)42℃精準熱激45秒及25-30℃低溫誘導(dǎo)策略。

詳細介紹

【??參數(shù)信息】

英文名稱:OverExpress C43(DE3) Chemically Competent Cell

中文名稱:OverExpress C43(DE3)大腸桿菌化學感受態(tài)細胞,OverExpress C43(DE3)化學感受態(tài)細胞

規(guī)格:50×100μl,10x100ul

運輸:低溫運輸。

純度:≥95%

儲存條件:-20℃避光干燥

生產(chǎn)廠商:西安強化生物科技

【簡單概述】

OverExpress C43(DE3)是一種經(jīng)過基因工程改造的大腸桿菌(E. coli)菌株,專為高效表達毒性蛋白或疏水性蛋白而設(shè)計。

OverExpress C43(DE3)化學感受態(tài)細胞,其核心特點包括:

起源與基因型:

源自BL21(DE3)菌株,通過篩選獲得至少兩個未知突變,這些突變使其能耐受并高效表達對普通大腸桿菌有毒的蛋白質(zhì)。

基因型為: F? ompT hsdSB (rB? mB?) gal dcm (DE3)。

功能定位:

用于表達真核/原核生物中的毒性蛋白(如膜蛋白、疏水性蛋白)及病毒、哺乳動物等來源的重組蛋白。

兼容pET、pGEX、pMAL等T7啟動子驅(qū)動的表達載體。

【使用方法】

一、細胞解凍與DNA混合

解凍感受態(tài)細胞:將C43(DE3)感受態(tài)細胞從-80°C冰箱取出,置于冰上緩慢解凍(約5-10分鐘)。

加入質(zhì)粒DNA:取50μL解凍細胞,加入1-5μL重組質(zhì)粒DNA(推薦質(zhì)粒濃度≤10 ng/μL),輕柔混勻后冰浴30分鐘。

二、熱激轉(zhuǎn)化

熱激處理:將混合液置于42°C水浴中精確熱激45秒,迅速放回冰浴2分鐘。

復(fù)蘇培養(yǎng):加入450μL預(yù)熱的SOC或LB培養(yǎng)基,37°C、200 rpm振蕩培養(yǎng)60分鐘以恢復(fù)細胞活性。

三、涂板篩選

涂布抗生素平板:取100-200μL復(fù)蘇菌液涂布于含對應(yīng)抗生素的LB瓊脂平板。

培養(yǎng):37°C倒置培養(yǎng)12-16小時,直至單菌落出現(xiàn)。

四、蛋白誘導(dǎo)表達

接種與培養(yǎng):挑取單菌落接種至含抗生素的LB培養(yǎng)基,37°C振蕩培養(yǎng)至OD600≈0.6(對數(shù)中期)。

誘導(dǎo)條件:

誘導(dǎo)劑:加入IPTG(終濃度0.1-1 mM)。

溫度與時間:通常降低溫度至25-30°C,誘導(dǎo)4-16小時。

五、關(guān)鍵注意事項

菌株特性:

C43(DE3)衍生自BL21(DE3),通過突變篩選獲得對膜蛋白毒性的高耐受性,尤其適合表達膜蛋白。

其轉(zhuǎn)錄組上調(diào)了膜蛋白生物合成相關(guān)基因,促進正確折疊與膜整合。

質(zhì)粒選擇:避免使用含lacI的誘導(dǎo)型載體,以免抑制菌株的表達調(diào)控優(yōu)勢。

替代方案:若需更精細調(diào)控表達,可考慮Lemo21(DE3)菌株。

【相關(guān)試劑】

mFluor Red 780 酸

mFluor Violet 510 酸

mFluor Blue 585琥珀酰亞胺酯

iFluor 680 amine iFluor 680 胺

iFluor 680 hydrazide iFluor 680酰肼

Pan-caspase Inhibitor Z-VAD-FMK

Z-YVAD-FMK (Caspase-1 inhibitor)

Z-DEVD-FMK (Caspase-3 inhibitor)

CCCP (50 mM)凋亡誘導(dǎo)劑/質(zhì)子載體

Ac-DEVD-CHO (Caspase-3/7 inhibitor)

SYBR Green I Nucleic Acid Stain (PCR Grade, 10,000×)

EPI400 Electrocompetent cell 大腸桿菌電轉(zhuǎn)感受態(tài)細胞

以上資料由西安強化生物科技有限公司xxn整理!

本試劑僅適用于科研實驗,敬請知悉。




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