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C58C1農(nóng)桿菌電轉(zhuǎn)感受態(tài)細(xì)胞

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參考價(jià):￥500 - ￥15000 /mg

具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)

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更新時(shí)間：2025-08-27 08:47:59瀏覽次數(shù)：228次

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  熒光染料

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西安強(qiáng)化生物科技有限公司

經(jīng)營(yíng)模式：生產(chǎn)廠家

商鋪產(chǎn)品：496條

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

C58C1農(nóng)桿菌電轉(zhuǎn)感受態(tài)細(xì)胞，應(yīng)用大質(zhì)粒轉(zhuǎn)化，轉(zhuǎn)化效率＞10 cfu/μg DNA，具備鏈霉su和li福平雙抗性，-20℃避光保存，干冰運(yùn)輸確?；钚?/p>

詳細(xì)介紹

【??參數(shù)信息】

英文名稱：C58C1 Electrocompetent Cell 農(nóng)桿菌電轉(zhuǎn)感受態(tài)細(xì)胞

中文名稱：C58C1農(nóng)桿菌電轉(zhuǎn)感受態(tài)細(xì)胞

運(yùn)輸：干冰運(yùn)輸。

檢測(cè)轉(zhuǎn)化效率：>105 cfu/μg DNA。

規(guī)格：10×50μl，50×50μl

純度：≥95%

儲(chǔ)存條件：-20℃避光干燥

生產(chǎn)廠商：西安強(qiáng)化生物科技

【簡(jiǎn)單概述】

C58C1 是一種發(fā)根農(nóng)桿菌（Agrobacterium rhizogenes）菌株，基因型為C58 染色體背景，并攜帶pRiA4b 農(nóng)桿堿型 Ri 質(zhì)粒。

該菌株具有strR和rifR雙抗性，對(duì)羧芐青霉su等敏感。

C58C1農(nóng)桿菌電轉(zhuǎn)感受態(tài)細(xì)胞經(jīng)特殊工藝制作，適合大質(zhì)粒的轉(zhuǎn)化。

基因型為Agrobacterium rhizogenes (strR,rifR) pRiA4b (agropine type)，經(jīng)pCAMBIA2301質(zhì)粒檢測(cè)轉(zhuǎn)化效率>105 cfu/μg DNA。

【操作步驟】

（一）電擊杯預(yù)處理

從75%乙醇中取出電擊杯，倒置瀝干5分鐘 → 正置5分鐘使乙醇揮發(fā) → 插入碎冰預(yù)冷5分鐘（壓實(shí)冰面，杯頂離冰面0.5cm）

（二）感受態(tài)細(xì)胞與質(zhì)?；旌?/span>

取-80℃保存的感受態(tài)細(xì)胞，冰浴5分鐘至融化

加入 0.01~1 μg質(zhì)粒DNA（體積≤6μl，不超過(guò)細(xì)胞體積的1/10）

輕柔混勻：手指輕彈管底或槍頭吹打（避免渦旋或劇烈震蕩）

（三）電轉(zhuǎn)化

將混合液轉(zhuǎn)入預(yù)冷的電擊杯，避免氣泡 → 蓋緊杯蓋

設(shè)置電轉(zhuǎn)參數(shù)：

電壓：2400 V

電容：25 μF

電阻：200 Ω

啟動(dòng)電轉(zhuǎn)儀，電擊后迅速將電擊杯放回冰中冷卻1分鐘

（四）復(fù)蘇培養(yǎng)

向電擊杯中加入700 μl無(wú)抗生素LB培養(yǎng)基 → 吸回混合液至原EP管

28℃、150-200 rpm振蕩培養(yǎng) 2-3小時(shí)。

（五）涂板篩選

6000 rpm離心1分鐘 → 棄上清，保留約100 μl液體。

重懸菌體，涂布于含抗生素的平板。

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C58C1農(nóng)桿菌電轉(zhuǎn)感受態(tài)細(xì)胞