【??參數(shù)信息】
英文名稱：Ar Qual Electrocompetent Cell 農(nóng)桿菌電轉(zhuǎn)感受態(tài)細胞
中文名稱：Ar Qual農(nóng)桿菌電轉(zhuǎn)感受態(tài)細胞
【簡單概述】
Ar Qual農(nóng)桿菌電轉(zhuǎn)感受態(tài)細胞是一種通過電穿孔技術(shù)實現(xiàn)基因轉(zhuǎn)化的發(fā)根農(nóng)桿菌感受態(tài)細胞。其核心特征包括：
基因型為 Agrobacterium rhizogenes Ar Qual Ri（agropine type），攜帶天然農(nóng)桿堿型Ri質(zhì)粒。
抗性標記：對strR和CamR具有抗性，對carb、rif敏感，對kan部分敏感
經(jīng)特殊工藝制備，適用于大質(zhì)粒的轉(zhuǎn)化（如基因組文庫構(gòu)建）。
包裝含電轉(zhuǎn)感受態(tài)細胞（10×50μl或50×50μl）及對照質(zhì)粒pCAMBIA2301。
宿主范圍：具有廣泛的植物宿主適應(yīng)性，可用于雙子葉和單子葉植物的遺傳轉(zhuǎn)化。
【常規(guī)操作方法】
（1）0.1 cm電擊杯和杯蓋從儲存液中拿出倒置于干凈的吸水紙上5分鐘，待其瀝干水分。
正置5分鐘，使乙醇充分揮發(fā)，待乙醇揮發(fā)干凈立即插入冰中，壓實冰面。
電極杯頂離冰面0.5 cm以方便蓋上杯蓋，冰中靜置5分鐘充分降溫。
（2）取-80℃保存的農(nóng)桿菌感受態(tài)插入冰中5分鐘，待其融化。
加入0.01-1 μg質(zhì)粒DNA，用手bo打管底混勻，立即插入冰中。
用200 μl槍頭將感受態(tài)-質(zhì)?；旌衔锟焖僖频诫姄舯?，蓋上杯蓋，空管保留待用。
（3）啟動電轉(zhuǎn)儀，設(shè)置參數(shù)：C=25 μF，PC=200 ohm，V=2400 V，將電擊杯從冰中拿出。
吸水紙吸干外表面水份，快速放入電轉(zhuǎn)槽中。
啟動電擊，電擊完成快速插入冰中，加入1 ml無抗生素的TY，并轉(zhuǎn)移到感受態(tài)空管中，28℃振蕩培養(yǎng)2~3小時。
（4）6000 rpm離心一分鐘收菌，留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊涂布于含相應(yīng)抗生素的TY平板上，倒置放于28℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)2-3天。
【相關(guān)試劑】
DH5α Electrocompetent cell
ATCC15834 Electrocompetent Cell
MSU440 Electrocompetent Cell
Ar 1193 Electrocompetent Cell
Ar Qual Electrocompetent Cell
Ar A4 Electrocompetent Cell
C58C1 Electrocompetent Cell
HT115(DE3) Chemically Competent Cell
PE-Streptavidin，PE-Cy7標記鏈霉親和素
Annexin V-EGFP/PI Apoptosis Detection Kit
Annexin V-APC/7-AAD Apoptosis Detection Kit
OverExpress C43(DE3) Chemically Competent Cell
OverExpress C43(DE3)pLysS Chemically Competent Cell
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