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西安強化生物科技有限公司


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博萊霉su

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參  考  價:￥500 - ￥15000 /mg
具體成交價以合同協(xié)議為準
  • 產(chǎn)品型號

  • 品牌

    其他品牌

  • 廠商性質(zhì)

    生產(chǎn)商

  • 所在地

    西安市

聯(lián)系方式：李杰查看聯(lián)系方式

更新時間：2025-08-20 08:36:04瀏覽次數(shù)：176次

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經(jīng)營模式：生產(chǎn)廠家

商鋪產(chǎn)品：496條

所在地區(qū)：陜西西安市

聯(lián)系人：李杰 （經(jīng)理）

產(chǎn)品簡介

博萊霉su，是一種銅螯合糖肽抗生素，進入細胞后釋放銅離子并嵌入DNA使其斷裂，導致細胞死亡。Shble基因賦予抗性，本品為100mg/ml無菌溶液，適用于細胞培養(yǎng)篩選。

詳細介紹

【??參數(shù)信息】

英文名稱：Zeocin (100mg/ml)

中文名稱：博萊霉su（100 mg/ml）

CAS NO：11006-33-0

化學式：C55H83N19O21S2Cu

分子量：1137.41 g/mol

狀態(tài)：藍色溶液

純度：≥95%

儲存條件：-20℃避光干燥

生產(chǎn)廠商：西安強化生物科技

【簡單概述】

博萊霉su是一種堿性、水溶性、銅離子螯合的糖肽抗生素。

銅離子的存在使得溶液為藍色，此銅螯合的形式為無活性。

當抗生素進入細胞后，二價銅離子（Cu2+）被還原為一價銅離子（Cu+），并被細胞內(nèi)的巰基化合物去除。

銅離子被去除后，Zeocin被活化，嵌入DNA使其斷裂，終導致細胞死亡。

來自Streptoalloteichus hindustanus的Shble基因賦予Zeocin抗性，該基因編碼一種13,665Da大小的蛋白，以化學計量方式結(jié)合Zeocin，抑制其DNA雙鏈切割活性。

因此，能表達此蛋白的真核和原核宿主細胞被賦予Zeocin抗性。

本品為溶于去離子水的無菌溶液，濃度為100mg/ml，細胞培養(yǎng)級別。

【操作步驟（以哺乳動物細胞為例）】

（一）細胞對Zeocin敏感性的確定（殺滅曲線建立）

1）重新鋪板或者將滿盤細胞重新分盤，使得細胞密度約25%，按照8個平板/組準備，培養(yǎng)24h，去除舊培養(yǎng)基。

2）加入含不同濃度Zeocin的篩選培養(yǎng)基，Zeocin濃度可設(shè)置為0, 50, 100, 200, 400, 600, 800和1000 μg/ml，每個濃度做3個平行；也可根據(jù)自身實驗體系，設(shè)置不同的濃度梯度。

3）每3-4天更換新鮮的篩選培養(yǎng)基，并觀察存活細胞的比例。選擇在合適時間（1-2周內(nèi)）殺死大多數(shù)細胞的濃度為合適工作濃度。

（二）篩選穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細胞系

1）轉(zhuǎn)染細胞，用100mm培養(yǎng)皿進行培養(yǎng)。以未轉(zhuǎn)染的細胞作為陰性對照。

2）轉(zhuǎn)染后，用預熱的1X PBS洗滌一次，加入新鮮培養(yǎng)基。

3）轉(zhuǎn)染48-72h后，用含合適濃度Zeocin（由滅殺曲線確定）的新鮮培養(yǎng)基篩選細胞。為了更好的鑒定和篩選細胞集落，建議將細胞按比例稀釋成一系列濃度。

4）每3-4天更換新鮮的選擇培養(yǎng)基，直到出現(xiàn)細胞集落。

5）挑選并轉(zhuǎn)移克隆到96或48孔板中。在進行更大孔徑培養(yǎng)板或培養(yǎng)皿上擴大培養(yǎng)之前，確保培養(yǎng)細胞密度。

（三）穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細胞系的維持培養(yǎng)

可采取以下方式維持培養(yǎng)穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細胞：

1）使用含相同劑量Zeocin的篩選培養(yǎng)基來維持培養(yǎng)；

2）降低Zeocin劑量為原來的一半進行維持培養(yǎng)；

3）使用正好能預防敏感細胞生長但不足以致死的Zeocin劑量來維持培養(yǎng)【根據(jù)殺滅曲線來判斷】。

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以上資料由西安強化生物科技有限公司xxn整理！

本試劑僅適用于科研實驗，敬請知悉。



關(guān)鍵詞：培養(yǎng)皿

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