【??參數信息】
英文名稱:PEI 25K Transfection Reagent
溶解性:溶于熱水、低pH冷水、甲醇和乙醇;不溶于苯、丙酮
【簡單概述】
PEI25K線性化聚乙烯亞胺轉染試劑,一種高電荷陽離子聚合物,容易結合于高電荷陰離子基質。
工業(yè)應用上,線性化PEI可改善負電荷染料的物理外觀,以調整染料的化學特性和增強染料與固相基質的黏附能力,常用作黏附增強劑,作用同多聚賴氨酸(poly-lysine);
科研應用上,線性化PEI能與DNA或其他負電荷生物大分子簡單結合,正是這一特性,使得成為一種非常行之有效的載體運輸介質(Vector carrier),即轉
線性化聚乙烯亞胺PEI 25000是一款優(yōu)秀、低成本、值得信賴的瞬時性轉染試劑。
在HEK293和CHO表達系統中,PEI在寬廣的生產規(guī)模內(從96孔板到100L生物反應器)能提供連續(xù)性的高基因表達。
本品是PEI25K的無菌溶液,濃度為1mg/ml,直接使用即可。按照DNA:PEI25K=1:3的比例來操作,1ml本品足以用來轉染330μg DNA,或者,6孔板內約做80-160次轉染。
【作用機制】
PEI 25K的作用機制基于其 陽離子特性和“質子海綿效應"(Proton Sponge Effect):
PEI分子富含質子化氨基(每三個原子含一個可質子化氮原子),在生理pH下帶正電荷。
通過靜電作用與帶負電荷的DNA(或其他核酸)結合,形成穩(wěn)定的PEI/DNA復合物。
PEI的“質子海綿效應"是其核心機制:在酸性內體/溶酶體環(huán)境中,PEI大量吸收質子,導致內體滲透壓升高并腫脹破裂,釋放復合物至細胞質。
釋放的DNA進入細胞核,與轉錄因子結合啟動基因表達。
轉染后24小時開始表達,36-48小時達峰值(比脂質體試劑延遲6-12小時)。
【相關試劑】
DH5α Electrocompetent cell
TOP 10 Electrocompetent cell
ATCC15834 Electrocompetent Cell
Annexin V-FITC/PI Apoptosis Detection Kit
High-pure Laminin from Mouse EHS sarcoma
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