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S17-1 λpir Chemically Competent Cell

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參  考  價(jià):¥1 - ¥99999 /mg
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
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    生產(chǎn)商

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聯(lián)系方式:李杰查看聯(lián)系方式

更新時(shí)間:2025-07-14 08:49:02瀏覽次數(shù):346次

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經(jīng)營(yíng)模式:生產(chǎn)廠家

商鋪產(chǎn)品:496條

所在地區(qū):陜西西安市

聯(lián)系人:李杰 (經(jīng)理)

產(chǎn)品簡(jiǎn)介

S17-1 λpir Chemically Competent Cell是一種經(jīng)基因工程改造的大腸桿菌菌株,用于DNA克隆和接合轉(zhuǎn)移實(shí)驗(yàn)。

詳細(xì)介紹

【參數(shù)信息】

英文名稱:S17-1 λpir Chemically Competent Cell

中文名稱:S17-1 λpir大腸桿菌化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞

狀態(tài):冷凍細(xì)胞懸液(液態(tài))

包裝:10×100μl;50×100μl

純度:≥95%

儲(chǔ)存條件:-20℃避光干燥

生產(chǎn)廠商:西安強(qiáng)化生物科技

【簡(jiǎn)單概述】

S17-1 λpir Chemically Competent Cell,S17-1 λpir化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞是一種經(jīng)基因工程改造的大腸桿菌菌株,用于DNA克隆和接合轉(zhuǎn)移實(shí)驗(yàn)。

其核心特征包括:

遺傳背景:

基因型:RP4-2(Km::Tn7, Tc::Mu-1), pro-82, LAMpir, recA1, endA1, thiE1, hsdR17, creC510。

關(guān)鍵突變:

recA1:重組酶缺陷,減少外源DNA的同源重組,保證插入片段的穩(wěn)定性。

endA1:核酸內(nèi)切酶缺陷,提高質(zhì)粒DNA的產(chǎn)量和純度。

hsdR17:限制系統(tǒng)缺陷,允許甲基化DNA的克隆。

Tn7轉(zhuǎn)座子:賦予弱鏈霉su抗性。

特殊元件:

RP4-2質(zhì)粒整合:染色體中整合了RP4-2接合轉(zhuǎn)移質(zhì)粒,可介導(dǎo)DNA在接合菌株間轉(zhuǎn)移,模擬細(xì)菌接合效應(yīng)。

λpir基因:攜帶λ噬菌體pir基因,支持依賴π蛋白復(fù)制的質(zhì)粒的擴(kuò)增。

特性:

轉(zhuǎn)化效率:使用pUC19質(zhì)粒檢測(cè)時(shí),效率>10? cfu/μg DNA。

【作用機(jī)制】

(1)化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞的通用機(jī)制

化學(xué)感受態(tài)是通過(guò)理化處理(如CaCl2)誘導(dǎo)細(xì)胞處于可攝取外源DNA的生理狀態(tài)。其核心步驟包括:

細(xì)胞膜通透性改變:

在0℃ CaCl2低滲溶液中,細(xì)胞膨脹成球形,Ca2+與細(xì)胞膜磷脂層結(jié)合形成液晶結(jié)構(gòu),增加通透性。

Ca2+與DNA磷酸基團(tuán)形成羥基-鈣磷酸復(fù)合物,抗DNase降解并粘附于細(xì)胞表面。

熱激觸發(fā)DNA內(nèi)化:

42℃短時(shí)熱激(45-90秒)擾動(dòng)細(xì)胞膜結(jié)構(gòu),形成瞬時(shí)孔隙,促進(jìn)DNA復(fù)合物內(nèi)化。

恢復(fù)與表達(dá):

在豐富培養(yǎng)基(如LB)中復(fù)蘇,細(xì)胞修復(fù)膜結(jié)構(gòu)并分裂增殖,外源基因得以表達(dá)。

爭(zhēng)議與進(jìn)展:傳統(tǒng)認(rèn)為轉(zhuǎn)化是物理化學(xué)過(guò)程,但近年研究表明Ca2+可能激活固有信號(hào)通路,暗示存在主動(dòng)調(diào)控機(jī)制。

(2)S17-1 λpir的機(jī)制

接合轉(zhuǎn)移模擬:

整合的RP4-2質(zhì)粒編碼接合轉(zhuǎn)移裝置(性菌毛),無(wú)需輔助菌株即可介導(dǎo)大片段DNA(如轉(zhuǎn)座子載體)向受體菌轉(zhuǎn)移,適用于:

雙親接合實(shí)驗(yàn):如將質(zhì)粒從E.coli S17-1λpir轉(zhuǎn)移至脫氮副球菌。

載體構(gòu)建:用于染色體插入突變。

遺傳穩(wěn)定性保障:

recA1突變:抑制同源重組,維持外源DNA完整性。

endA1突變:減少質(zhì)粒降解,提升提取質(zhì)粒的純度。

λpir依賴性質(zhì)粒擴(kuò)增:

pir基因表達(dá)π蛋白,支持R6K復(fù)制子質(zhì)粒的復(fù)制,常用于克隆不穩(wěn)定載體。

【相關(guān)試劑】

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以上資料由西安強(qiáng)化生物科技有限公司xxn整理!

本試劑僅適用于科研實(shí)驗(yàn),敬請(qǐng)知悉。




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