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S17-1 λpir Chemically Competent Cell

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參考價(jià):￥1 - ￥99999 /mg

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更新時(shí)間：2025-07-14 08:49:02瀏覽次數(shù)：346次

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產(chǎn)品分類 品牌分類

  熒光染料

iF類

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鬼筆環(huán)肽

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  其他品牌

西安強(qiáng)化生物科技有限公司

經(jīng)營(yíng)模式：生產(chǎn)廠家

商鋪產(chǎn)品：496條

所在地區(qū)：陜西西安市

聯(lián)系人：李杰（經(jīng)理）

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

S17-1 λpir Chemically Competent Cell是一種經(jīng)基因工程改造的大腸桿菌菌株，用于DNA克隆和接合轉(zhuǎn)移實(shí)驗(yàn)。

詳細(xì)介紹

【參數(shù)信息】

英文名稱：S17-1 λpir Chemically Competent Cell

中文名稱：S17-1 λpir大腸桿菌化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞

狀態(tài)：冷凍細(xì)胞懸液（液態(tài)）

包裝：10×100μl；50×100μl

純度：≥95%

儲(chǔ)存條件：-20℃避光干燥

生產(chǎn)廠商：西安強(qiáng)化生物科技

【簡(jiǎn)單概述】

S17-1 λpir Chemically Competent Cell，S17-1 λpir化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞是一種經(jīng)基因工程改造的大腸桿菌菌株，用于DNA克隆和接合轉(zhuǎn)移實(shí)驗(yàn)。

其核心特征包括：

遺傳背景：

基因型：RP4-2(Km::Tn7, Tc::Mu-1), pro-82, LAMpir, recA1, endA1, thiE1, hsdR17, creC510。

關(guān)鍵突變：

recA1：重組酶缺陷，減少外源DNA的同源重組，保證插入片段的穩(wěn)定性。

endA1：核酸內(nèi)切酶缺陷，提高質(zhì)粒DNA的產(chǎn)量和純度。

hsdR17：限制系統(tǒng)缺陷，允許甲基化DNA的克隆。

Tn7轉(zhuǎn)座子：賦予弱鏈霉su抗性。

特殊元件：

RP4-2質(zhì)粒整合：染色體中整合了RP4-2接合轉(zhuǎn)移質(zhì)粒，可介導(dǎo)DNA在接合菌株間轉(zhuǎn)移，模擬細(xì)菌接合效應(yīng)。

λpir基因：攜帶λ噬菌體pir基因，支持依賴π蛋白復(fù)制的質(zhì)粒的擴(kuò)增。

特性：

轉(zhuǎn)化效率：使用pUC19質(zhì)粒檢測(cè)時(shí)，效率>10? cfu/μg DNA。

【作用機(jī)制】

（1）化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞的通用機(jī)制

化學(xué)感受態(tài)是通過(guò)理化處理（如CaCl2）誘導(dǎo)細(xì)胞處于可攝取外源DNA的生理狀態(tài)。其核心步驟包括：

細(xì)胞膜通透性改變：

在0℃ CaCl2低滲溶液中，細(xì)胞膨脹成球形，Ca2+與細(xì)胞膜磷脂層結(jié)合形成液晶結(jié)構(gòu)，增加通透性。

Ca2+與DNA磷酸基團(tuán)形成羥基-鈣磷酸復(fù)合物，抗DNase降解并粘附于細(xì)胞表面。

熱激觸發(fā)DNA內(nèi)化：

42℃短時(shí)熱激（45-90秒）擾動(dòng)細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)，形成瞬時(shí)孔隙，促進(jìn)DNA復(fù)合物內(nèi)化。

恢復(fù)與表達(dá)：

在豐富培養(yǎng)基（如LB）中復(fù)蘇，細(xì)胞修復(fù)膜結(jié)構(gòu)并分裂增殖，外源基因得以表達(dá)。

爭(zhēng)議與進(jìn)展：傳統(tǒng)認(rèn)為轉(zhuǎn)化是物理化學(xué)過(guò)程，但近年研究表明Ca2+可能激活固有信號(hào)通路，暗示存在主動(dòng)調(diào)控機(jī)制。

（2）S17-1 λpir的機(jī)制

接合轉(zhuǎn)移模擬：

整合的RP4-2質(zhì)粒編碼接合轉(zhuǎn)移裝置（性菌毛），無(wú)需輔助菌株即可介導(dǎo)大片段DNA（如轉(zhuǎn)座子載體）向受體菌轉(zhuǎn)移，適用于：

雙親接合實(shí)驗(yàn)：如將質(zhì)粒從E.coli S17-1λpir轉(zhuǎn)移至脫氮副球菌。

載體構(gòu)建：用于染色體插入突變。

遺傳穩(wěn)定性保障：

recA1突變：抑制同源重組，維持外源DNA完整性。

endA1突變：減少質(zhì)粒降解，提升提取質(zhì)粒的純度。

λpir依賴性質(zhì)粒擴(kuò)增：

pir基因表達(dá)π蛋白，支持R6K復(fù)制子質(zhì)粒的復(fù)制，常用于克隆不穩(wěn)定載體。

【相關(guān)試劑】

CDCFDA，SE

AF 555-Streptavidin

AF 594-Streptavidin

AF 750-Streptavidin

Celltracker CM-Dil

Acti-stain555phalloidin

PropidiumMonoazide(PMA)

BMPO(Spin trapping reagent)

Fluo-4?Pentapotassium?Salt Fluo-4五鉀鹽

BAPTA,Tetrasodium Salt鈣螯合劑，126824-24-6

73630-08-7，BAPTA,Tetrapotassium Salt鈣螯合劑

EGTA AM,CalciumChelator鈣螯合劑，99590-86-0

Angiotensin (1-7) 血管緊張su（1-7），CAS：51833-78-4

Angiotensin (1-9) 血管緊張su（1-9），CAS：34273-12-6

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本試劑僅適用于科研實(shí)驗(yàn)，敬請(qǐng)知悉。

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S17-1 λpir Chemically Competent Cell