試劑名稱:鈣螯合劑EGTA AM,CalciumChelator
儲(chǔ)存:-20℃干燥避光保存至少1年,冰袋運(yùn)輸。
鈣螯合劑EGTA AM,CalciumChelator,是EGTA(乙二胺四乙酸)的乙酰氧基甲酯衍生物,具有細(xì)胞膜滲透性。
能夠被動(dòng)進(jìn)入細(xì)胞并被胞內(nèi)酯酶水解為EGTA,從而在細(xì)胞內(nèi)發(fā)揮鈣離子螯合作用。
EGTA對(duì)Ca2+的親和力比Mg2+高10?倍,特別適合在含鎂離子的生理環(huán)境中選擇性調(diào)控鈣 。
螯合機(jī)制:通過羧基、氨基等基團(tuán)與Ca2+形成環(huán)狀絡(luò)合物,鈍化離子活性。
AM基團(tuán)增強(qiáng)脂溶性,被動(dòng)跨膜后,胞內(nèi)酯酶水解AM基團(tuán),釋放極性EGTA分子滯留細(xì)胞內(nèi) 。
二、實(shí)驗(yàn)應(yīng)用與方案
鈣信號(hào)通路研究:評(píng)估胞內(nèi)鈣變化在細(xì)胞增殖、凋亡、分化中的作用 。
與熒光探針(如Fluo-3 AM)聯(lián)用,校準(zhǔn)鈣濃度曲線 。
電生理學(xué):防止鈣依賴性電壓門控通道失活,提升記錄準(zhǔn)確性 。
(二)標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)方案
無水DMSO配制2-5 mM儲(chǔ)備液(避免反復(fù)凍融) 。
條件與參數(shù):Hanks/Hepes緩沖液 + 0.04% Pluronic® F-127
條件與參數(shù):37℃避光30-120分鐘)
條件與參數(shù):緩沖液沖洗3次,平衡20分鐘促水解
條件與參數(shù):300 μM ATP誘導(dǎo)鈣釋放,F(xiàn)ITC通道成像
用于科研相關(guān)領(lǐng)域,不能用于人體實(shí)驗(yàn)!
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