試劑名稱:Fluo-4?Pentapotassium?Salt,Fluo-4五鉀鹽
儲(chǔ)存:-20℃干燥避光保存至少1年,冰袋運(yùn)輸。
Fluo-4?Pentapotassium?Salt,Fluo-4五鉀鹽是一種鈣離子熒光探針,具有非細(xì)胞膜滲透性,需通過微注射、膜片電極或劃痕標(biāo)記等方式加載進(jìn)入細(xì)胞以檢測(cè)胞內(nèi)鈣離子水平 。
其在無鈣離子存在時(shí)幾乎不發(fā)光,但與鈣離子結(jié)合后熒光強(qiáng)度至少增加100倍,激發(fā)波長(zhǎng)為494 nm,發(fā)射波長(zhǎng)為516 nm 。
此外,Fluo-4五鉀鹽的解離常數(shù)(Kd)為345 nM(Ca2+),適用于檢測(cè)高瞬時(shí)鈣離子濃度 。
核心應(yīng)用:細(xì)胞內(nèi)鈣離子動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)
檢測(cè)原理:鈣結(jié)合后觸發(fā)分子內(nèi)電荷轉(zhuǎn)移,激活熒光團(tuán)。
瞬態(tài)鈣信號(hào):如神經(jīng)元?jiǎng)幼麟娢弧⑿募〖?xì)胞鈣震蕩。
設(shè)備兼容性:激光共聚焦顯微鏡、流式細(xì)胞儀、熒光酶標(biāo)儀。
較Fluo-3熒光強(qiáng)度提升近一倍,激發(fā)效率更高。
選擇性優(yōu)于其他二價(jià)陽(yáng)離子。
微注射、膜片鉗電極、劃痕標(biāo)記、胞飲作用。
固定化應(yīng)用:通過EDC/EDAC處理可原位固定于細(xì)胞,兼容免疫熒光研究。
母體結(jié)構(gòu)修飾:以Fluo-3為基礎(chǔ),氯離子(Cl?)替換為氟離子(F?)。
可能涉及KF催化(如離子對(duì)促進(jìn)劑[(n-Bu)?N?]?SO??)在t-BuOH/H?O中90°C反應(yīng)。
或使用NFSI(N-氟代雙苯磺酰亞胺)在低溫條件下進(jìn)行。
成鹽步驟:羧酸前體與氫氧化鉀中和,生成五鉀鹽以提升水溶性。
大規(guī)模自動(dòng)化合成,色譜純化確保純度≥90%。
質(zhì)量控制:HPLC驗(yàn)證純度,避免雜質(zhì)干擾鈣結(jié)合。
用于科研相關(guān)領(lǐng)域,不能用于人體實(shí)驗(yàn)!
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