試劑名稱:iFluor 405 Phalloidin,iFluor 405 鬼筆環(huán)肽
iFluor 405 鬼筆環(huán)肽是一種用于檢測細胞內(nèi)F-actin的熒光標(biāo)記物。
該試劑屬于一系列與肌動蛋白結(jié)合的化合物,可通過熒光顯微鏡在Ex/Em = 400/421 nm下檢測。
Phalloidin-iFluor 405試劑可穩(wěn)定肌動蛋白纖維,防止其解聚,并且適用于固定細胞和懸浮細胞,可與抗體結(jié)合進行雙重染色。
本品在固定樣本上使用簡單,只需20-90分鐘的孵育和3次短洗。
此外,iFluor 405 Phalloidin具有高亮度、穩(wěn)定性和良好的熒光特性,適用于細胞生物學(xué)研究中的F-actin染色。
高信噪比:非特異性背景低于抗體染色法,染色對比度明顯 。
光穩(wěn)定性:熒光亮度與穩(wěn)定性媲美Alexa Fluor 405-Phalloidin,適合長時間成像 。
多重標(biāo)記兼容性:可與熒光蛋白、量子點、二抗等聯(lián)合使用,適用于共定位研究 。
二、作用機制
結(jié)合位點:鬼筆環(huán)肽結(jié)合在F-actin亞基間的界面,將相鄰亞基“鎖定"在一起,形成穩(wěn)定的復(fù)合物。
親和力差異:對F-actin的親和力遠高于G-actin(單體),因此僅標(biāo)記已聚合的肌動蛋白絲。
2. 穩(wěn)定肌動蛋白絲結(jié)構(gòu)
通過降低肌動蛋白亞基從纖維末端的解離速率常數(shù),阻止微絲解聚。
結(jié)合后改變F-actin構(gòu)象,使肌動蛋白單體處于與G-actin不同的狀態(tài),阻礙ADP釋放。
抑制F-actin的ATP水解活性,進一步穩(wěn)定纖維結(jié)構(gòu)。
將肌動蛋白聚合的臨界濃度降低10-30倍,促進微絲形成。
顯微注射后,鬼筆環(huán)肽通過穩(wěn)定F-actin阻斷細胞遷移,證明肌動蛋白組裝/解組裝對運動性的重要性。
注意:天然鬼筆環(huán)肽及衍生物無法穿透細胞膜,需顯微注射或細胞固定處理。
用于科研相關(guān)領(lǐng)域,不能用于人體實驗!
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