試劑名稱(chēng):LysoSensor Green DND-189溶酶體綠色熒光探針;溶酶體綠色熒光探針LysoSensor DND-189
儲(chǔ)存:-20℃干燥避光保存至少1年,冰袋運(yùn)輸。
溶酶體綠色熒光探針LysoSensor DND-189用于測(cè)量活細(xì)胞中酸性細(xì)胞器(如溶酶體)pH值。
該探針在酸性環(huán)境中熒光增強(qiáng),其 pKa 值約為 5.2 。
它適用于多種細(xì)胞類(lèi)型,包括貼壁細(xì)胞和懸浮細(xì)胞 。
該探針的激發(fā)波長(zhǎng)為 443 nm,發(fā)射波長(zhǎng)為 505 nm,通常在熒光顯微鏡下觀察 。
此外,LysoSensor Green DND-189 也可用于流式細(xì)胞術(shù)和熒光光度計(jì)分析 。
注意事項(xiàng):溶解性是在室溫下測(cè)定的,如果溫度過(guò)低,可能會(huì)影響其溶解性。
二、實(shí)驗(yàn)操作流程
工作液配制:1 mM原液用培養(yǎng)基或緩沖液稀釋至≥1 μM(建議起始濃度),現(xiàn)配現(xiàn)用。
優(yōu)化建議:根據(jù)細(xì)胞膜通透性調(diào)整濃度,避免假陽(yáng)性。
2. 37℃預(yù)熱工作液替換培養(yǎng)基,孵育30 min–2 h;
3. 新鮮培養(yǎng)基洗滌,熒光顯微鏡觀察。
核心設(shè)備:熒光顯微鏡(濾光片:Ex 430–460 nm, Em 500–540 nm)。
擴(kuò)展應(yīng)用:流式細(xì)胞儀(需驗(yàn)證熒光衰減)、熒光酶標(biāo)儀(動(dòng)力學(xué)分析)。
三、與其他溶酶體探針對(duì)比
探針名稱(chēng):LysoSensor Green DND-189
特點(diǎn):酸性增強(qiáng),高靈敏度
適用場(chǎng)景:pH動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)
探針名稱(chēng):LysoTracker Green DND-26
特點(diǎn):非pH依賴(lài)性,長(zhǎng)效標(biāo)記
探針名稱(chēng):LysoSensor Yellow/Blue
特點(diǎn):雙發(fā)射,寬pH響應(yīng)
用于科研相關(guān)領(lǐng)域,不能用于人體實(shí)驗(yàn)!
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