試劑名稱:Recombinant Cholera Toxin B subunit,CF568-conjugated重組霍亂毒素B亞基(CF568標記,紅色熒光)
重組霍亂毒素B亞基(CF568標記,紅色熒光)由5個相同的非糖基化亞基構成五聚體環(huán)狀結構,每個亞基含103-124個氨基酸(信號肽21個),分子量約11.6 kDa/亞基,總分子量約58 kDa。
五聚體構象:孔直徑約1.2 nm,通過氫鍵和疏水作用維持穩(wěn)定性,此構象是其高親和力結合GM1的關鍵。
GM1結合機制:通過亞基殘基(Gly33、Trp88等)以“雙指緊夾"模式嵌入GM1的寡糖鏈,形成氫鍵和疏水接觸,結合親和力達nM級。
靶向遞送:結合GM1后誘導細胞膜內(nèi)吞,協(xié)助毒素A亞基進入細胞。
免疫佐劑:激活樹突細胞、促進TGF-β分泌,增強黏膜免疫反應。
神經(jīng)示蹤:被軸突末端吸收后逆行運輸至神經(jīng)元胞體,標記神經(jīng)回路。
脂筏標記:GM1富集于脂筏,用于動態(tài)追蹤膜信號轉導 。
復溶方法:凍干粉室溫平衡30分鐘,離心后加無菌水或PBS至1 mg/mL母液,分裝避光保存(4℃穩(wěn)定3個月,-20℃穩(wěn)定6個月)。
工作液配制:用預冷HBSS + 0.5% BSA稀釋至400 ng/mL–1 μg/mL,減少非特異性結合。
加入染色工作液,4℃避光孵育30分鐘(抑制內(nèi)吞);
固定后成像,可選Hoechst 33342復染核。
組織切片染色:Triton X-100透化,5% BSA封閉,CTB-CF568(1:200)室溫孵育2小時。
共聚焦顯微鏡:激發(fā)561 nm,發(fā)射濾片580–620 nm;需設陰性對照排除自發(fā)熒光 。
三、技術優(yōu)勢與比較
傳統(tǒng)標記物(如Alexa Fluor 568)
Carboxy-PTIO(cPTIO)一氧化氮清除劑
Firefly Luciferase,Recombinant
Mag-Fura-2 Tetrapotassium Salt
BAPTA,Tetrasodium Salt鈣螯合劑126824-24-6
73630-08-7,BAPTA,Tetrapotassium Salt鈣螯合劑
EGTA AM,CalciumChelator鈣螯合劑,99590-86-0
S-Nitrosoglutathione(GSNO)
MitoSOX Red Mitochondrial Superoxide Indicator
MitoTEMPOL線粒體靶向SOD模擬物,1101113-39-6
Ethidium Homodimer 1 (EthD-1),溴乙啡錠二聚體1,61926-22-5
Hydroxystilbamidine(FluoroGold)羥芪巴脒(熒光金)223769-64-0
Aminoethoxyvinylglycine (AVG) Hydrochloride
Firefly Luciferase Reporter Gene Assay Kit螢火蟲螢光素酶報告基因檢測試劑盒