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產(chǎn)地	國產(chǎn)	級別	其他

產(chǎn)品信息

產(chǎn)品名稱	產(chǎn)品編號	規(guī)格
Profusion™ DNA Polymerase 超高保真DNA聚合酶	HRF0085	100 U
	HRF0086	500 U
	HRF0087	1000 U

產(chǎn)品描述

Profusion™ DNA Polymerase 是一款超高保真 DNA 聚合酶，其采用蛋白融合技術(shù)且具有通用引物退火功能。它是一款融合到持續(xù)合成能力增強域的火球菌屬樣校正 DNA 聚合酶，使 Profusion™ DNA 聚合酶產(chǎn)生具有高準確度、靈敏度和抑制劑耐受性的 PCR 序列。該酶具有 5’→3’DNA 聚合酶活性和 3’→5’核酸外切酶活性，其保真性是 Taq DNA 聚合酶的 100倍。酶溶液中添加了延伸因子使得該酶具有長片段擴增能力，擴增速度達到 15-30sec/kb ，擴增目的片段的長度可長達 20 kb。本產(chǎn)品配備了優(yōu)化緩沖液，添加了 PCR 增強組分，使得該酶適用于復雜模板的擴增。擴增產(chǎn)物為平末端。

產(chǎn)品組分

組分名稱	規(guī)格
	HRF0085	HRF0086	HRF0087
	（100 U）	（500 U）	（1000 U）
Profusion™ DNA Polymerase (2 U/μL）	50 μL	250 μL	250 μL×2
2×Profusion™ PCR buffer （含 Mg²⁺）	1 mL×3	1 mL×15	1 mL×30
10mM dNTP	100 μL	500 μL	1000 μL
6×DNA loading buffer	1 mL	1 mL×5	1 mL×10

產(chǎn)品應(yīng)用

1.高保真 PCR

2.基因克隆

3.生成測序模板

4.高 GC 含量 PCR

5.長片段 PCR（長達 20 kb）

6.突變

7.高通量 PCR

活性定義

用活性化的大馬哈魚精子 DNA 為模板/引物， 74℃ ，30 min 內(nèi)，攝入 10 nmol 的全核苷酸為酸性不溶物的活性定義為 1 U。

運輸和保存方法

冰袋運輸。-20℃保存，有效期1年。

DNA Polymerase 超高保真DNA聚合酶

推薦PCR反應(yīng)體系（冰盒上配制）

組分	體積（μL）	終濃度
ddH₂O	to 50 μL	-
2×Profusion™ PCR buffer （含 Mg²⁺）	25 μL	1×
10mM dNTP	1uL	0.2mM
DNA 模板	適量	-
Primer 正向 (10 μM)	2.5 μL	0.5 μM
Primer 反向 (10 μM)	2.5 μL	0.5 μM
Profusion™ DNA Polymerase (2 U/μL)	0.5 μL	1 U/50 μL

【注】

1）試劑使用：使用前請充分融解和混勻。

2）聚合酶濃度：推薦使用 1 U/50 μL，可以在 0.5-2 U/50 μL 之間進行優(yōu)化，不要超過2 U/50 μL。

3）聚合酶添加：高保真酶有 3’→5’外切酶活性，可能會降解引物，配制反應(yīng)體系時，酶應(yīng)該在最后添加。

4）Mg²⁺終濃度：體系終濃度為 1.5 mM。如有特殊需要，可用 50 mM MgCl₂，以 0.2-0.5 mM 為間隔向上摸索。

5）高 GC 模板：高GC含量的片段擴增時，體系中加入終濃度為 3%的 DMSO 有利于擴增，可明顯的提高擴增的效率。

不同模板的推薦使用量（50 μL 反應(yīng)體系）：

模板種類	擴增片段1kb-10kb
基因組 DNA	50 ng-250 ng
質(zhì)粒或病毒 DNA	1pg-10 ng
cDNA	1-5 μL (不超過 PCR 反應(yīng)總體積的10%)