如何判斷ELISA試劑盒的靈敏度是否達標

　　結(jié)合之前提到的ELISA試劑盒靈敏度相關(guān)背景信息，判斷其靈敏度是否達標可通過三步完成，全程可落地驗證，避免虛標產(chǎn)品影響實驗結(jié)果。

　　一、說明書標稱參數(shù)

　　明確區(qū)分?檢測限LOD?和?定量限LOQ?，LOD數(shù)值越低代表理論靈敏度越高。

　　確認標稱LOD單位符合實驗需求，低豐度靶標需達到pg/mL級別，且僅標注“高靈敏度"無具體數(shù)值的產(chǎn)品直接判定為不達標。

　　標稱LOQ數(shù)值，若實驗需要精確定量低濃度樣本，LOQ需高于LOD且滿足CV≤20%的要求。

　　二、通過標準曲線直觀驗證

　　觀察標準曲線非零濃度點，該點濃度越低，試劑盒實際設(shè)計靈敏度越高。

　　檢查低濃度區(qū)擬合優(yōu)度，要求?R2≥0.99?，低濃度點無明顯偏離曲線的情況。

　　查看低濃度區(qū)曲線斜率，斜率越陡峭，對低濃度靶標的響應(yīng)靈敏度越高。

　　三、實驗實測完成最終判定

　　重復檢測20次以上空白零標準品，用酶標儀讀取所有孔OD值。

　　按公式?LOD=空白信號均值+3×空白信號標準差?計算實測檢測限。

　　驗證信噪比S/N≥3，低濃度點變異系數(shù)CV≤20%，回收率在80%-120%區(qū)間即為達標。

　　注：以上科研產(chǎn)品資料供參考，具體可咨詢技術(shù)老師!

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