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單B細胞篩選技術服務

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產(chǎn)品型號

品       牌其他品牌

廠商性質(zhì)生產(chǎn)商

所  在  地天津市

聯(lián)系方式:楊會杰查看聯(lián)系方式

更新時間:2024-12-18 14:47:04瀏覽次數(shù):217次

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經(jīng)營模式:生產(chǎn)廠家

商鋪產(chǎn)品:5條

所在地區(qū):天津天津市

聯(lián)系人:楊會杰 (市場運營)

產(chǎn)品簡介
產(chǎn)地 國產(chǎn) 級別 其他
證書 ISO系列證書    

卡梅德科技提供專業(yè)的單B細胞篩選技術服務,從篩選時間到獲得高質(zhì)量的抗體均有優(yōu)勢,可提供從抗原設計、合成與修飾到動物免疫、單B細胞富集篩選,表達與純化,功能驗證等一站式技術服務,滿足客戶不同的需求。

詳細介紹

單B細胞篩選技術服務:


單個B細胞抗體技術作為新一代抗體開發(fā)技術,可以從單個B細胞中高效、快速的分離抗體,是繼雜交瘤、噬菌體展示后又一抗體產(chǎn)生技術的突破。可利用單B細胞篩選技術制備兔、鼠、駝、羊、雞等多物種的單克隆抗體,單B細胞技術具有高特異性、高活性和高親和力等突出優(yōu)勢,卡梅德科技基于單B細胞篩選平臺,從篩選時間到獲得高質(zhì)量的抗體均有優(yōu)勢,可提供從抗原設計、合成與修飾到動物免疫、單B細胞富集篩選,表達與純化,功能驗證等一站式技術服務,滿足客戶不同的需求。

卡梅德科技(KMD Bioscience) 基于單B細胞篩選平臺提供相應的不同物種的抗體制備服務,并且可通過抗體測序,獲得序列信息一站式的服務也為客戶提供更優(yōu)質(zhì)的選擇,滿足您的需要,配合抗體生產(chǎn)平臺、抗體發(fā)現(xiàn)平臺等助您快速獲得高質(zhì)量的抗體。


單B細胞篩選技術服務流程:


1)單個B細胞的分離
單B細胞可以通過隨機分離和抗原特異性分離兩種方式,從外周血或淋巴組織中提取。隨機B細胞分離可采用顯微操作、激光捕獲顯微切割或熒光激活細胞分選(FACS)等技術進行篩選。抗原特異性分離則可以使用抗原包被的磁珠、熒光標記抗原的多參數(shù)FACS、溶血斑塊實驗或熒光焦點法來篩選特異性B細胞。利用FACS技術,研究人員能夠根據(jù)特定細胞表面標志物的表達模式,清晰區(qū)分待分選B細胞的發(fā)育和分化階段,幾乎可以從任何階段的B細胞中進行分選。為確保獲得特異性抗體,需在單細胞分離前評估供體的免疫應答,例如通過酶聯(lián)免疫斑點技術(ELISPOT)測定外周血中抗體特異性細胞(ASC)的豐度,從而選擇含有較高抗原特異性抗體濃度的血樣進行后續(xù)制備。
2)單B細胞抗體的測序和克隆
單細胞的cDNA合成通常在96孔板上進行。全長免疫球蛋白(Ig)基因的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物通過巢式或半巢式RT-PCR擴增。對于抗體重鏈和輕鏈的可變區(qū),設計前向引物的混合物,而反向引物則特異性互補于抗體的恒定區(qū)。在某些情況下,如果需要分離和擴增不同同種型的抗體,反向引物將是特異性互補于各類同種型抗體恒定區(qū)的混合物。擴增后的基因可直接轉(zhuǎn)染至哺乳動物細胞中,以實現(xiàn)單克隆抗體的體外表達。

3)抗體的表達和篩選
在鑒定抗體或抗體片段的抗原特異性和生物活性之前,需要將攜帶抗體基因的表達載體在適當?shù)南到y(tǒng)中進行表達。常見的表達系統(tǒng)是原核系統(tǒng)(如大腸桿菌),而哺乳動物細胞系統(tǒng)(如HEK 293或CHO細胞)則更適合進行抗體的翻譯后修飾,主要采用瞬時表達或穩(wěn)定表達。在大腸桿菌中,通??贵w基因以抗原結(jié)合片段(Fab)的形式表達,而在哺乳動物細胞中,則以完整的IgG形式進行表達。通過這一系列步驟,研究人員能夠高效獲得特異性抗體,為后續(xù)的應用提供支持。




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