詳細介紹

OCR、ECAR 或 PER 是線粒體呼吸、糖酵解以及 ATP 生成速率的關(guān)鍵指標。綜合這些檢測結(jié)果可在系統(tǒng)水平表征培養(yǎng)細胞和體外樣品的細胞代謝功能。
安捷倫 Seahorse Analytics 現(xiàn)可提供的數(shù)據(jù)分析功能。安捷倫 Seahorse XF Pro 軟件提供了新的軟件工具,包括更容易的板設(shè)置、板布局導(dǎo)入、熱力圖和計量響應(yīng)曲線視圖。新的數(shù)據(jù)質(zhì)量視圖會自動標記錯誤數(shù)據(jù),這使得排除離群數(shù)據(jù)點更加簡單。
研究使用。不可用于診斷目的。
特性:
在低 OCR 下具有更高的精度,可實現(xiàn)對更多免疫細胞類型及生物能量代謝受損的細胞類型的可靠分析經(jīng)驗證的儀器性能可為中、高 OCR/PER 速率范圍提供經(jīng)驗證的低 CV%,確保板與板之間的 XF 數(shù)據(jù)一致
在幾分鐘內(nèi)報告實時代謝率,而無需樣品提取或標記
具有自動混合功能的四加藥口系統(tǒng),能實時檢測活細胞對底物、抑制劑及其他化合物的反應(yīng)
實現(xiàn)定制 96 孔板中每孔僅 5000 個細胞的高靈敏度分析
精密控溫加熱托盤可維持在 16–42 °C(室溫以上 8–20 °C),兼容多種樣品類型
XF Pro Controller 軟件能助您輕松創(chuàng)建檢測方案,并提供簡潔的用戶引導(dǎo)界面,方便您執(zhí)行 XF 檢測。Wave Pro 數(shù)據(jù)質(zhì)量視圖自動標記錯誤數(shù)據(jù),用戶可輕松排除離群數(shù)據(jù)點。
工作原理:
實時監(jiān)測微孔板中的活細胞生物能量代謝:
線粒體呼吸和糖酵解這兩個主要的能量產(chǎn)生途徑,分別涉及細胞耗氧量和質(zhì)子釋放率。Seahorse XF 技術(shù)使用無標記傳感器檢測這些分析物中的細胞外變化,以測定細胞呼吸率、糖酵解和 ATP 產(chǎn)生。將細胞接種于定制 96 孔 XF 微孔板的分析孔中,融合率為 50%–90%。懸浮細胞附著在孔底,實現(xiàn)靈敏度。
形成微室,并以分鐘為單位計算細胞外流量的速率:
儀器將探針板降低至分析孔中。傳感器位于孔底上方 200 μm 處,形成約 2 μL 的瞬時微室。隨著氧氣和 pH 水平的變化,儀器可讀取傳感器的相應(yīng)變化。通常進行 3 分鐘測量,然后自動計算速率。測量期結(jié)束后,升高探針,使細胞外培養(yǎng)基恢復(fù)到基線條件。
最多注入 4 種化合物,實時測試響應(yīng)或研究生物學(xué)機理:
探針板還配置有加藥口(每孔 4 個),可在分析過程中將調(diào)節(jié)因子注入細胞孔中。當完成儀器方案配置后,系統(tǒng)會將化合物“A"注入分析孔中,緩慢混合,確?;衔镌诜治雠囵B(yǎng)基中均勻分布。所有孔以此方式同步處理。系統(tǒng)將自動執(zhí)行后續(xù)測量周期、方案規(guī)定的任何額外加藥及速率計算。

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