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熒光物質（fluorescentmaterial）又稱為熒光素（fluorescein或luciferin）、熒光色素或熒光探針，是指能夠吸收光并能在較短時間內發(fā)射熒光，而且能作為染料的化合物。熒光素通常具有芳香環(huán)結構。

（1）熒光效率：熒光色素能發(fā)出熒光，除具備合適的能量外，還須具備高熒光效率。熒光效率（fluorescence efficiency）即熒光量子產(chǎn)率，是指熒光物質吸收光后發(fā)射出的熒光光量子數(shù)與其所吸收激發(fā)光光量子數(shù)之比。

即 熒光效率=發(fā)射熒光的光量子數(shù)÷吸收光的光量子數(shù)

熒光量子產(chǎn)率數(shù)值反映了熒光物質將吸收的光能轉化為熒光的效率，其數(shù)值越大。該物質的熒光越強，用于熒光分析的熒光物質熒光量子產(chǎn)率數(shù)值要求達到0．35以上。大部分物質沒有發(fā)射熒光的性質，即使是熒光色素也不能將吸收的全部光轉變?yōu)闊晒?，而是在發(fā)射熒光的同時，或多或少地以其他形式釋放其所吸收的光能：因此，在通常情況下，熒光量子產(chǎn)率數(shù)值總是小于1。

（2）熒光強度：熒光強度（fluorescence intensity）是指熒光色素發(fā)射熒光的光量子數(shù)，決定熒光色素檢測的靈敏度。在一定范圍內，激發(fā)光越強．熒光也越強，即熒光強度等于吸收光強度乘以熒光效率。所以，選用適當強度的光源作為激發(fā)光源和選用適合于被檢熒光物質選擇性吸收的光譜濾片作為激發(fā)濾片，是提高熒光強度的根本方法。

（3）熒光物質的吸收光譜和發(fā)射光譜：每種熒光物質的吸收光不僅有一定波長。而且在各波長上的吸收量也不同，從而構成特殊的吸收光譜曲線；發(fā)射熒光的情況也是如此。因此，熒光物質在一定條件下有一定的吸收光譜（激發(fā)光譜）和發(fā)射光譜（熒光光譜），如吖啶橙的吸收光譜（zui大吸收波長）是455nm，其發(fā)射波長光譜為450～700nm。因此，吖啶橙與不同細胞成分結合后。可產(chǎn)生橙、黃、紅、綠等熒光。了解各種熒光染料的吸收光譜和發(fā)射光譜，有利于在觀察被檢標本時，有效地選擇適當?shù)臑V片，獲得的熒光效果。

（4）熒光穩(wěn)定性：提高激發(fā)光強度固然可以提高熒光強度，但激發(fā)光強度不可能無限提高。因為激發(fā)光強度超過一定限度時光吸收趨于飽和，而且不可逆地破壞激發(fā)態(tài)分子，這種現(xiàn)象稱光漂白。對于熒光顯微鏡和激光共聚焦顯微鏡而言，如光源長時間照射樣品?？蓪е鹿馄赚F(xiàn)象，嚴重影響檢測。解決光漂白問題zui直接的方法：一是降低光照強度，二是使用抗淬滅劑（anti-fade reagent）。