公司動(dòng)態(tài)
提高IHC方法敏感性的輔助手段
發(fā)布時(shí)間:2010-7-9(1)蛋白酶消化蛋白酶消化可以去除覆蓋于抗原決定簇表面的雜蛋白,更為重要的是因甲醛固定而引起的交聯(lián)被打開(kāi),有利于抗原—抗體的結(jié)合,提高陽(yáng)性檢測(cè)率。
(2)抗原修復(fù)選擇適宜的修復(fù)液(pH值、離子濃度)、修復(fù)方式、溫度。
(3)抗原修復(fù)與酶消化結(jié)合使用。
(4)高敏感顯色方法的選擇DAB是IHC染色中HRPzui常用的供氫體,如在其顯色液中加入一定量的金屬離子,例如Ni、Cu、Ag等,不但可提高其敏感性,還可以改變其終產(chǎn)物的顏色。TMB即四甲基聯(lián)苯胺鹽酸鹽,是一種敏感性較高的顯色基團(tuán)。NBT/BCIP為堿性磷酸常用的顯色劑,其敏感性要遠(yuǎn)高于HRP的DNA顯色劑。另外,開(kāi)展膜上雜交或蛋白檢測(cè)可用高敏感的化學(xué)發(fā)光檢測(cè)技術(shù)。
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