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SDS 平板膠片鑄造︰
1） 整?出兩組玻璃片及白板鑄膠組合，先用酒?拭凈，并選擇合適的間隔條（0.75 mm） 組合起?。請熟悉鑄膠三明治組合的正確組裝方式，以免灌入的膠液?出?。
2） 三明治組合后直?站好，準備所要濃?的SDS 膠體溶液如表4.2。 兩片0.75mm 厚的平板膠片約需10 mL 分離膠體溶液，以及5 mL 焦集膠體溶液。APS液到zui后才加入，未加APS 以前可在真空中抽去溶液中的氣體。

配制兩片0.75 mm 膠片所需膠體 （mL）
3） 以上分離膠體各成份在小燒杯中混合均勻后，可直接沿著玻璃一側(cè)倒入鑄膠組合到預(yù)定高? （約八成高），勿陷住氣泡；再輕輕加上一層isopropanol。 也可使用滴管慢慢加入膠體，同樣勿注入氣泡。
4） 約30 min 可凝結(jié)，以濾紙吸去isopropanol，同法倒入焦集膠體溶液，要加到滿；盡快插入樣品槽齒模，注意?可有氣泡陷在膠體中。一般在凝膠完成后，膠體與所加的水層的間，會出現(xiàn)清楚的直線界面，但因為背景為白色，較??觀察的。
5） 再?凝結(jié)后取下齒模即可使用。???刻使用，則把整個膠片組合用保鮮膜包好，膠面上方加一水層，勿使干掉，在4℃約可放1~2 周。
電泳方法︰
6） ?膠片組合保存于4℃，則要等待膠片*回?室溫，才架到電泳槽。膠片一定要*回溫，否則在進?電泳時，玻璃會因熱脹而破?。
7） 取F液稀釋成一倍溶液，并加SDS成為0.1%；先倒入下方的正極槽，注意?可有氣泡黏在膠體，然后倒入上方的負極槽。用微?針筒或微?移液器一個一個清洗樣本槽，除去殘?在槽內(nèi)的膠體 （刷牙）。刷牙的動作很重要，而且要*，否則注入樣本時，會有大麻煩。又因為白色氧化鋁板乃白色背景，?容?看出樣本槽的位置，可用Hoefer 所附的透明樣本槽位置模板，作為指引，順?可練習(xí)樣本添加的動作。
8） 取蛋白質(zhì)樣本溶液，加入同體積E 液，以及適?追蹤染?bromophenol blue，混勻后在100℃加熱10 min。放?短暫離心后即可依次以微?移液器注入樣本槽，樣本體積可自斟酌，但要記好位置及體積；通常?使用5~15uL。注入樣本時，盡?把針頭或吸管伸到樣本槽底部，但?要觸到樣本槽底的膠面，則可以使得樣本所占的體積zui小，分離效果較好。
9） 裝上電源蓋，以100~150 V進?電泳，zui高可加至200 V，視實驗的緊急程?，以及膠片發(fā)熱的情形而定。通電后兩極附近會?刻產(chǎn)生無數(shù)細微氣泡，是通電的特征。
10） 追蹤染?很快進入膠體，開始焦集成藍色細線，并向下泳動，大約1 h 可泳動到底邊，中止電泳，除去電源蓋。有些分子?較大的樣本，或使用濃?較高的膠片，可以等到藍色細線泳出膠體才停止。
膠片染色法：
11） 取出膠片組合，使玻璃板向上，先除去兩側(cè)間隔條，再以扁形藥匙輕輕撬起玻璃，膠片則?在白板上。切除焦集膠體，并在分離膠片的右上方截角做記號 （區(qū)別膠片的左右）。
12） 取染色盤 （大約比膠片稍大），倒入CBR染色液，在染色盤上方把上述白板倒翻過?，挑起膠片一角，?用重?使膠片掉?到染色缸中。?要進?蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)印，則膠片?能染色，要浸入轉(zhuǎn)印緩沖液中。
13） 在CBR 中染色約30 min，染色盤要加密蓋，置于旋轉(zhuǎn)平臺慢速50 rpm 搖蕩的；要注意膠片是否*沒入染色液中，否則會造成染色?均勻。
14） 染色后小心把CBR 染劑倒回原?瓶中，整塊膠片變成藍色，先用自?水洗掉殘余的染色液，再倒入約20 mL 脫色液，加密蓋后再放回旋轉(zhuǎn)平臺搖蕩。染色脫色過程請戴手套，否則會在膠片上?下指紋。
15） 膠片的藍色背景漸漸脫掉，待脫色液轉(zhuǎn)成藍色后，可以換新脫色液；如此脫色數(shù)次，在一小時內(nèi)應(yīng)可看到蛋白質(zhì)的藍色色帶出現(xiàn)。用過的脫色液，請回收倒在有機溶液的廢液桶中。
16） 待膠片背景*透明后，染色脫色完成。倒去脫色液，改用50%甲醇液洗一兩次，待膠片縮至大約原?的尺寸，則可準備干燥的。
膠片干燥法：
17） 把玻璃紙cellophane 先用水浸濕，平鋪在干燥用的玻璃片上，玻璃紙會比玻璃片大，因此四周有多出?的部份。
18） 把膠片平鋪在玻璃紙*，膠片與玻璃紙間?要有任何氣泡。 除?氣泡的外，?膠片沒有回?原?的大小，或者膠片的四邊有傷痕，?很容?造成膠片干燥后的??現(xiàn)象。
19） 在膠片上再加一層浸濕的玻璃紙，也?要陷有氣泡在內(nèi)；把玻璃紙多出?的部份反折到玻璃背面，用手抹平表面水份，并用紙巾吸干。
20） 把此干片三明治組合放在桌上，次日即可得到已經(jīng)干燥好的膠片，用電風(fēng)扇或?氣機吹的，可以加快干片速?。 干片后用指甲尖輕敲膠片，?還可以看到指甲所?下的痕跡，表示膠片并未*干燥，要再等候。
21） 待膠片*干燥后，以美工刀或剪刀去除多余的玻璃紙，再加以護貝，則可*保存的。免疫染色的轉(zhuǎn)印紙，也可以護貝保存。