公司動(dòng)態(tài)
熒光抗體的制備
發(fā)布時(shí)間:2010-5-2熒光抗體是將抗體與熒光素結(jié)合而形成的偶聯(lián)物
(一)抗體
用于熒光素標(biāo)記的抗體要求特異性強(qiáng)、純度高、效價(jià)滿意,瓊脂雙向擴(kuò)散效價(jià)不低于1:20(稀釋抗體)或環(huán)狀沉淀實(shí)驗(yàn)效價(jià)高于1:4000(稀釋抗原)。一般是特異性抗血清或用抗(人或其他動(dòng)物)Ig的免疫血清提純的IgG,或相應(yīng)的單克隆抗體都可用于熒光素標(biāo)記。
(二)熒光素
熒光素是一種能夠吸收激發(fā)光的能量而產(chǎn)生熒光,并能作為染料使用的有機(jī)化合物。適用于抗體標(biāo)記的熒光素須具備以下條件:
1、具有能與蛋白質(zhì)分子形成穩(wěn)定共價(jià)鍵結(jié)合的化學(xué)基團(tuán),或易于轉(zhuǎn)變?yōu)榇祟惢鶊F(tuán)而不破壞其熒光結(jié)構(gòu)。
2、熒光效率高,與蛋白質(zhì)結(jié)合的需要量很少。
3、與抗體或抗原結(jié)合后,應(yīng)不影響其免疫學(xué)特異性。
4、偶聯(lián)物產(chǎn)生的熒光顏色與背景組織的自發(fā)熒光對(duì)比鮮明、清晰,容易判斷。
5、熒光素與蛋白質(zhì)結(jié)合的方法簡便、快速,游離的熒光素及其降解產(chǎn)物容易去除。
6、在一般儲(chǔ)存條件下,其結(jié)合物的性能穩(wěn)定,可保存使用較長時(shí)間。
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