技術(shù)文章
細(xì)胞培養(yǎng)板的選擇
發(fā)布時(shí)間:2017-12-28細(xì)胞培養(yǎng)板作為培養(yǎng)細(xì)胞的一種常用和重要的工具,形狀、規(guī)格、用途多樣。根據(jù)底部形狀的不同可分為平底和圓底(U 型和V 型);根據(jù)培養(yǎng)孔的孔數(shù)不同有 6、12、24、48、96、384、1536 孔培養(yǎng)板等;根據(jù)材質(zhì)的不同有 Terasaki 板和普通細(xì)胞培養(yǎng)板。
你是否為如何選擇適合的培養(yǎng)板而迷茫?獻(xiàn)上丁香園資深站友總結(jié)的「細(xì)胞培養(yǎng)板的選擇」。
平底和圓底(U型和V型)培養(yǎng)板的區(qū)別和選擇
不同形狀的板子自然有不同用途。平底的什么類型的細(xì)胞都可用﹐但當(dāng)細(xì)胞數(shù)目較少﹐如做克隆時(shí),就用 96 孔平底板。另外﹐做 MTT 等實(shí)驗(yàn)時(shí)﹐無論貼壁和懸浮細(xì)胞﹐一般均用平底板,這樣便于鏡下觀測、有明確的底面積、細(xì)胞培養(yǎng)液面高度相對一致,還便于 MTT 檢測。
至于 U 或 V 型板﹐一般在某些特殊要求時(shí)才使用。如在免疫學(xué)方面﹐當(dāng)做兩種不同淋巴細(xì)胞混合培養(yǎng)時(shí)﹐需要二者相互接觸以刺激,因此一般需要 U 型板﹐因細(xì)胞會(huì)由于重力的作用而聚集在一個(gè)很小的范圍內(nèi)。V 型板的用途更少﹐一般用于細(xì)胞殺傷實(shí)驗(yàn)時(shí)﹐為了使效靶細(xì)胞緊密接觸﹐常使用 V 型板﹐但這種實(shí)驗(yàn)也可用 U 型板替代(加入細(xì)胞后﹐低速離心)。除此之外,圓底培養(yǎng)板還可以拿來做分析、化學(xué)反應(yīng)、同位素?fù)饺氲膶?shí)驗(yàn)或是保存樣品用。
細(xì)胞培養(yǎng)板孔數(shù)的選擇
流式一般用 6 孔,MTT 一般用 96 孔,細(xì)胞爬片一般用 24 孔等,要具體根據(jù)你的實(shí)驗(yàn)來定。
Terasaki 板和普通細(xì)胞培養(yǎng)板的區(qū)別
Terasaki plate 主要是用于晶體學(xué)研究,產(chǎn)品設(shè)計(jì)便于對晶體的觀察與結(jié)構(gòu)分析,有 sitting 和 handing drop 兩種方法。兩種方法應(yīng)用產(chǎn)品的外形結(jié)構(gòu)也不同,材料上選擇 crystal class polymer,特殊的材料有利于觀察晶體結(jié)構(gòu)。
細(xì)胞培養(yǎng)板表面需要處理過,便于細(xì)胞貼壁生長與伸展。浮游細(xì)胞的生長,還要考慮降低結(jié)合表面積,這些就對材料有要求。
細(xì)胞培養(yǎng)板與酶標(biāo)板的區(qū)別
用多孔細(xì)胞培養(yǎng)板測吸光度肯定可以,實(shí)驗(yàn)室里精彩用它來做樣品的蛋白定量和 MTT 檢測。
區(qū)別:酶標(biāo)板一般要比細(xì)胞培養(yǎng)板貴,細(xì)胞板主要做細(xì)胞培養(yǎng),但也可以用來測蛋白濃度;酶標(biāo)板包括包被板和反應(yīng)板,一般不能用做細(xì)胞培養(yǎng),它主要做免疫酶聯(lián)反應(yīng)后的蛋白檢測,它需要更高的要求還需要特定的酶標(biāo)工作液。
常用不同培養(yǎng)板的孔底面積及推薦加液量
不同孔板所加培養(yǎng)液的液面都不宜太深,一般在 2-3 mm 范圍。結(jié)合不同孔的底面積就可算出各培養(yǎng)孔的適宜加液量。若加液量過多會(huì)影響氣體(氧氣)交換,而且在搬動(dòng)過程中易溢出造成污染,具體所加細(xì)胞密度依實(shí)驗(yàn)的目的不同靈活掌握。
附司徒的培養(yǎng)皿面積:
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