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技術(shù)文章

霉菌酵母菌樣品的稀釋

發(fā)布時(shí)間:2014-9-12

固體和半固體樣品:稱取25 g樣品至盛有225mL滅菌蒸餾水的錐形瓶中,充分振搖,即為1:10稀釋液?;蚍湃胧⒂?25 mL無(wú)菌蒸餾水的均質(zhì)袋中,用拍擊式均質(zhì)器(不推薦使用刀片式均質(zhì)器)拍打2min,制成1:10的樣品勻液。

,制成1:10的樣品勻液。

液體樣品:取25mL樣品至盛有225 mL無(wú)菌蒸餾水的錐形瓶(可在瓶?jī)?nèi)預(yù)臵適當(dāng)數(shù)量的無(wú)菌玻璃珠)中,充分混勻,制成1:10的樣品勻液。

取1mL1:10稀釋液注入含有9mL無(wú)菌水的試管中, 另?yè)Q一支1mL無(wú)菌吸管反復(fù)吹吸,此液為1:100稀釋液。

樣品的稀釋不推薦使用刀片式均質(zhì)器

原標(biāo)準(zhǔn)為“反復(fù)吹吸50次”(原標(biāo)準(zhǔn)為“反復(fù)吹吸50次”)??墒褂娩鰷u混勻器??墒褂娩鰷u混勻器拍擊式均質(zhì)器

取1mL1:10稀釋液注入含有9mL無(wú)菌水的試管中, 另?yè)Q一支1mL無(wú)菌吸管反復(fù)吹吸原標(biāo)準(zhǔn)為“反復(fù)吹吸5次”,此液為1:100稀釋液。

制備10倍系列稀釋樣品勻液。每遞增稀釋一次,換用1次1 mL無(wú)菌吸管。5.1.5根據(jù)對(duì)樣品污染狀況的估計(jì),選擇2個(gè)~3個(gè)(原標(biāo)準(zhǔn)為“3個(gè)”) (液體樣品可包括原液)在進(jìn)行10倍遞增稀釋的同時(shí),每個(gè)稀釋度分別吸取1 mL樣品勻液于2個(gè)無(wú)菌平皿內(nèi)。同時(shí)分別取1 mL稀釋液加入2個(gè)無(wú)菌平皿作空白對(duì)照。

及時(shí)將15mL~20 mL冷卻至46℃的馬鈴薯-葡萄糖瓊脂或孟加拉紅培養(yǎng)基(可放置46℃±1℃恒溫水浴箱中保溫)傾注平皿,并轉(zhuǎn)動(dòng)平皿使其混合均勻。

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