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 1．原理  碘化丙啶(propidium iodide，PI)不能穿人完整的活細(xì)胞膜中，即正常細(xì)胞和凋亡細(xì)胞在不固定的情況下對(duì)PI拒染，而壞死細(xì)胞 由于失去膜的完整性，PI可進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)與DNA結(jié)合，根據(jù)此特點(diǎn)，使用PI染色可鑒別死細(xì)胞。如果對(duì)活細(xì)胞染色必須在染色前進(jìn)行固定，以增加細(xì)胞膜對(duì)染料的通透性。

 

    2．溶液配制  使用0．01mol／LPBS(pH 7．4)配制終濃度為0．5mg／ml的PI工作液。

 

    3．染色程序

    (1)單層細(xì)胞培養(yǎng)標(biāo)本經(jīng)預(yù)冷70％乙醇固定1小時(shí)，4℃；

    (2)0．01mol／LPBS(pH 7．4)沖洗；

    (3)瀝干后加入PI工作液，室溫孵育15分鐘；

    (4)沖洗后封片。

 

    結(jié)果：PIzui大激發(fā)波長(zhǎng)和zui大發(fā)射波長(zhǎng)分別為488nm和630nm，熒光顯微鏡觀察，DNA呈紅色熒光。