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環(huán)境條件對淀粉酶活性的影響
發(fā)布時間：2013-12-13一、目的
植物組織中存在有淀粉酶（分α—、β—兩種），能將貯藏淀粉水解成麥芽糖。從而影響種子的萌發(fā)或植物的生長。本實驗的目的在于測定淀粉酶活性并觀察環(huán)境條件（如溫度、pH）及某些化學(xué)物質(zhì)對淀粉酶活性的影響。
二、原理
淀粉酶的活性和其他酶一樣，受環(huán)境條件的影響，尤其是對溫度及pH的變化非常敏感，表現(xiàn)有zui適溫度和zui適pH的現(xiàn)象。在zui適溫度及zui適pH的環(huán)境中，酶的活性zui強，酶促反應(yīng)速度zui高；低于或高于zui適溫度和zui適pH，酶活性變?nèi)?，酶促反?yīng)速度降低。
除溫度及pH外，某些化學(xué)物質(zhì)可抑制或促進(jìn)酶的活性?？梢种泼富钚缘幕瘜W(xué)物質(zhì)，稱為酶的抑制劑，可促進(jìn)酶活性的化學(xué)物質(zhì)，稱為酶的活化劑。
受環(huán)境條件影響后，淀粉酶活性的強弱可用碘試法來檢查。
三、材料、儀器設(shè)備及試劑
1 . 材料： 小麥種子；水稻種子。
2. 儀器設(shè)備： 恒溫水浴 ；恒溫培養(yǎng)箱；試管 ；150ml三角瓶；研缽 ；燒杯 ；移液管 ；膠頭滴管；試管 架；溫度計 。
3. 試劑：系列磷酸鹽－檸檬酸緩沖液；pH5.0醋酸緩沖液 （按附錄二配制）。
I －KI溶液： 稱取2g KI溶于蒸餾 水中，然后加入1g I2 ，待全部溶解后，用蒸餾 水定容至300ml，貯存于棕色瓶備用。
0.5 ％淀粉溶液。
1 ％CuSO4 溶液。
1 ％KI溶液。
0.1 ％HgCl2 溶液。
1 ％NaCl溶液。
0.1%AgNO3 溶液。
四、實驗步驟
1. 淀粉酶的提取
取已發(fā)芽的水稻或小麥種子（幼芽長3～4cm）20粒，放在研缽 中研磨，勻漿用100ml水分多次沖洗，集中于150ml三角瓶并充分?jǐn)嚢?、靜置1小時后，過濾入另一三角瓶，濾液中即含有淀粉酶，若要短期保存時，可加甲苯數(shù)滴防腐，并放入冰箱中。
2. 溫度對活性的影響淀粉酶
取試管5支，分別作15、30、45、60、75℃溫度標(biāo)記，并注明“酶液管”,各加入酶提取液5ml；另取5支試管，也分別作15、30、45、60、75℃溫度標(biāo)記，并注明“淀粉液管”，各加入0.5﹪淀粉液5ml；然后各管分別置于相對應(yīng)溫度的水浴 中，約5min后，待管內(nèi)外溫度一致，將酶液倒入相同溫度的淀粉液管中，搖勻并記下時間，10min后取出（不同處理之間，時間要一致），放入冰水中冷卻1min后，往每管加入I－KI溶液5滴，搖勻。觀察顏色有何不同，比較不同溫度對淀粉酶活性的影響，判斷zui適宜的酶促作用溫度。
3. pH 對淀粉酶活性的影響：
取4支中型試管，分別加入下列系列pH的磷酸鹽－檸檬酸鹽緩沖液3ml，并作標(biāo)記：pH 3.6、4.8、6.0、7.2。每管加入淀粉液3ml和淀粉酶提取液2ml，充分搖勻，記下時間，放置30℃左右溫度下20min后，向每管加入I－KI溶液5滴，搖勻，根據(jù)生成的顏色，比較淀粉酶的活性。
4. 化學(xué)物質(zhì)對淀粉酶活性的影響
取6支試管，編上1～6號，每管加入淀粉酶提取液1ml及pH5.0醋酸鹽緩沖液1ml，然后往1號管加蒸餾水1ml（對照）。2號管加1％NaCl 1ml，3號管加1％碘化鉀1ml，4號管中加1％CuSO4 1ml，5號管加0.1％AgNO3 1ml，6號管加入0.1％HgCl2 （注意，有毒?。?ml，各管再加0.5％淀粉液2ml，搖勻后置于40℃恒溫水浴中，并記錄開始時間，保溫8～10min,取出試管，冷卻后向各管加入I－KI溶液5滴，搖勻，觀察各管顏色的差異。
五、實驗結(jié)果記錄及分析
1. 用文字說明經(jīng)不同溫度，pH及各種化學(xué)物質(zhì)處理后各試管所顯示的顏色。
2. 用文字簡要分析環(huán)境條件對淀粉酶活性的影響。