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技術文章

PCR無擴增產(chǎn)物的原因及對策

發(fā)布時間:2011-11-21

現(xiàn)象:正對照有條帶,而樣品則無

  原因:

  1.模板:含有抑制物,含量低

  2.Buffer對樣品不合適

  3.引物設計不當或者發(fā)生降解

  4.反應條件:退火溫度太高,延伸時間太短

  對策:

  1.純化模板或者使用試劑盒提取模板DNA或加大模板的用量

  2.更換Buffer或調(diào)整濃度

  3.重新設計引物(避免鏈間二聚體和鏈內(nèi)二級結(jié)構)或者換一管新引物

  4.降低退火溫度、延長延伸時間

 

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