技術文章
聚合酶鏈式反應(PCR) 檢測肉毒梭菌技術
發(fā)布時間:2011-4-21
是運用PCR方法檢測肉毒神經毒素基因以鑒定肉毒梭菌,只需2~3天。特別是基層CDC在購買不到試驗動物的情況下,PCR所具有快速、簡便、特異型強的優(yōu)點無疑可作為肉毒中毒的輔助檢測手段和一項有價值的指標。
P.Fach(1993)報道,應用PCR可檢出食品樣品的肉毒梭菌A型菌株。趙晉、郭宗琪、楊小蓉等(2006)報道,應用PCR可檢出肉毒食物中毒的病原菌。用1對人工合成的寡核苷酸引物擴增A型、B型、C型、D型、E型、F型和G型肉毒神經毒素基因的一段264bp的DNA片段,并對兩個食物中毒樣品的增菌產毒培養(yǎng)液及分離的菌株進行檢測,結果從食物中毒樣品中檢出了肉毒梭菌。從而證明PCR方法能快速、準確地鑒定肉毒食物中毒樣品中病原菌。
PCR診斷還存在如下一些問題。如只能檢測肉毒梭菌,當中毒食品中只有毒素而無肉毒梭菌存在時,PCR的檢測沒有診斷價值;其次,按照肉毒食物中毒的判定依據(jù):WS/T83-1996“肉毒梭菌食物中毒診斷標準和處理原則”,并未將PCR方法納入其中。因此,在實際工作中,PCR方法不能取代GB/T4789.12-2003,只能作為一種有價值的輔助檢測方法。
P.Fach(1993)報道,應用PCR可檢出食品樣品的肉毒梭菌A型菌株。趙晉、郭宗琪、楊小蓉等(2006)報道,應用PCR可檢出肉毒食物中毒的病原菌。用1對人工合成的寡核苷酸引物擴增A型、B型、C型、D型、E型、F型和G型肉毒神經毒素基因的一段264bp的DNA片段,并對兩個食物中毒樣品的增菌產毒培養(yǎng)液及分離的菌株進行檢測,結果從食物中毒樣品中檢出了肉毒梭菌。從而證明PCR方法能快速、準確地鑒定肉毒食物中毒樣品中病原菌。
PCR診斷還存在如下一些問題。如只能檢測肉毒梭菌,當中毒食品中只有毒素而無肉毒梭菌存在時,PCR的檢測沒有診斷價值;其次,按照肉毒食物中毒的判定依據(jù):WS/T83-1996“肉毒梭菌食物中毒診斷標準和處理原則”,并未將PCR方法納入其中。因此,在實際工作中,PCR方法不能取代GB/T4789.12-2003,只能作為一種有價值的輔助檢測方法。
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