技術文章
熒光抗體技術檢測新城疫
發(fā)布時間:2011-3-7本法是將一類熒光性染料結合于抗體免疫球蛋白上,成為熒光性染料標記抗體。當此標記抗體與相應的抗原相遇,可發(fā)生特異性結合,標記在抗體上的熒光染料也被帶到抗原—抗體復合物上。此復合物在紫外線照射下,被激發(fā)產生光亮的熒光(黃綠色、紅色或藍色),可在熒光顯微鏡下看到。以異硫氰酸鹽熒光素標記雞高免血清IgG抗體而進行病毒抗原檢測的一種方法,該方法簡便、快速、敏感、準確,適用于快速診斷。
作為熒光技術檢查的材料以脾臟為,也可采用肺和肝,按常規(guī)方法冷凍切片制成標本,然后將新城疫熒光抗體稀釋成一定工作濃度,滴加入經固定的切片標本上,在37~C染色30min,取出立即用PBS(pH 8.0)反復洗3次,然后滴加0.1%伊文思藍,作用2~3s后,再用PBS沖洗;然后用9:1緩沖甘油封固,鏡檢。在熒光顯微鏡見熒光者為雞新城疫病毒所在部位。
莊向生等以NDV單抗熒光抗體標記物為試劑,以直接熒光抗體試驗(DFA)對各種弱毒株疫苗接種,強毒株人工感染和野外病例雞組織器官切片的ND抗原進行檢測,結果表明DFA是一種快速簡便、直觀、準確的診斷方法,較適合于ND野外毒株的診斷。趙智博等應用免疫熒光試驗(1FA)對無特定病原(SPF)雞群的NDV抗體進行檢測,結果表明IFA可檢出NDV早期感染。
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