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本法是將一類熒光性染料結(jié)合于抗體免疫球蛋白上，成為熒光性染料標(biāo)記抗體。當(dāng)此標(biāo)記抗體與相應(yīng)的抗原相遇，可發(fā)生特異性結(jié)合，標(biāo)記在抗體上的熒光染料也被帶到抗原—抗體復(fù)合物上。此復(fù)合物在紫外線照射下，被激發(fā)產(chǎn)生光亮的熒光（黃綠色、紅色或藍(lán)色），可在熒光顯微鏡下看到。以異硫氰酸鹽熒光素標(biāo)記雞高免血清IgG抗體而進(jìn)行病毒抗原檢測的一種方法，該方法簡便、快速、敏感、準(zhǔn)確，適用于快速診斷。

作為熒光技術(shù)檢查的材料以脾臟為，也可采用肺和肝，按常規(guī)方法冷凍切片制成標(biāo)本，然后將新城疫熒光抗體稀釋成一定工作濃度，滴加入經(jīng)固定的切片標(biāo)本上，在37~C染色30min，取出立即用PBS（pH 8．0）反復(fù)洗3次，然后滴加0．1％伊文思藍(lán)，作用2～3s后，再用PBS沖洗；然后用9：1緩沖甘油封固，鏡檢。在熒光顯微鏡見熒光者為雞新城疫病毒所在部位。

莊向生等以NDV單抗熒光抗體標(biāo)記物為試劑，以直接熒光抗體試驗（DFA）對各種弱毒株疫苗接種，強(qiáng)毒株人工感染和野外病例雞組織器官切片的ND抗原進(jìn)行檢測，結(jié)果表明DFA是一種快速簡便、直觀、準(zhǔn)確的診斷方法，較適合于ND野外毒株的診斷。趙智博等應(yīng)用免疫熒光試驗（1FA）對無特定病原（SPF）雞群的NDV抗體進(jìn)行檢測，結(jié)果表明IFA可檢出NDV早期感染。