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單克隆抗體技術(shù)檢測新城疫
發(fā)布時(shí)間：2011-3-7單克隆抗體僅僅識(shí)別一個(gè)抗原位點(diǎn)，用抗病毒蛋白的單克隆抗體就可以檢測出各種病毒毒株表面抗原之間的微小差異，從而通過抗原差異來研究病毒的變異并可對其分群歸類。20世紀(jì)80年代以來，國內(nèi)外很多實(shí)驗(yàn)室已制備出多株NDV單克隆抗體，并用其測知NDV有很多變種。
Russell等在1983年zui早以Ulster 2C弱毒株為抗原研制出針對新城疫病毒不同多肽成分的9株單克隆抗體，將新城疫病毒的毒株分為A—H 8個(gè)群，同一群中的病毒與這些單抗的反應(yīng)譜相同，大多數(shù)具有共同的生物學(xué)和流行病學(xué)特征。隨后國內(nèi)外許多學(xué)者分別研究出了針對新城疫病毒不同特征的單抗，應(yīng)用于病毒抗原差異等的研究。因?yàn)閭鹘y(tǒng)的新城疫診斷中，使用多克隆抗血清進(jìn)行HI試驗(yàn)來鑒定病毒，這種試驗(yàn)除可證明病毒存在外，不能提供病毒的任何其他信息，而為了分型常需進(jìn)行其他的試驗(yàn)。這種診斷所存在的問題，會(huì)隨著新城疫變異株的增多而增多，而且，HI試驗(yàn)中與其他一些禽副黏病毒（尤其是與PMV-3型）存在交叉反應(yīng)。單抗的應(yīng)用克服了常規(guī)血清的交叉反應(yīng)問題，所以應(yīng)用單抗診斷新城疫病毒的研究日益增多。
Meulemans等用兩種單抗混合物進(jìn)行HI試驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)它能夠高度抑制所有新城疫病毒被檢株，但與其他血清型的禽副黏病毒代表株不發(fā)生交叉反應(yīng)。
Alexander等應(yīng)用一種單抗，能在常規(guī)HI試驗(yàn)中抑制大多數(shù)新城疫病毒毒株，但不能抑制近來流行于鴿的變異株。
Judit等（1989）選出一株單抗在ELISA試驗(yàn)中對所有被檢的300多個(gè)強(qiáng)毒、中等毒力和弱毒株只能與LaSota株結(jié)合。
曹殿軍等制備了46株抗新城疫病毒單抗，檢測它們與不同新城疫病毒毒株的反應(yīng)性，證明單抗能檢出強(qiáng)、弱毒株之間的差異，為建立一種特異性強(qiáng)、靈敏度高、省時(shí)省力的新城疫病毒強(qiáng)、弱毒株鑒別診斷方法提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù)。但由于單抗的制備比較復(fù)雜、困難，限制了該技術(shù)的廣泛應(yīng)用。
對單克隆抗體分組的結(jié)果分析發(fā)現(xiàn)，在同組里的毒株有明顯的生物學(xué)及流行病學(xué)上的，這對抗原的變異及病毒的流行擴(kuò)散的研究都有重要意義。
單克隆抗體在檢測抗原性差異方面顯示出了*的*性，它可檢出抗原的微小差異，甚至單個(gè)氨基酸的變化也能檢出，從而使特異單抗成為區(qū)別NDV各毒株抗原性的有效手段，在NDV鑒定、分型、致病機(jī)理等研究方面將發(fā)揮重要的作用。