技術(shù)文章
間接血凝反應(yīng)法ELlSA診斷日本血吸蟲病
發(fā)布時(shí)間:2011-2-23
該法是以紅細(xì)胞為載體的抗原—抗體凝集反應(yīng)。采用微孔型有機(jī)反應(yīng)板,用凍干血凝抗原、被檢血清以生理鹽水作1;10、1:20、1:40稀釋,每孔加被檢血清0.05ml,再加致敏紅細(xì)胞抗原液l滴振蕩,靜置40-60min后觀察結(jié)果。如紅細(xì)胞呈顆粒凝結(jié),不論是全部或部分均判為陽性。如紅細(xì)胞沉淀于孔底,也有新的發(fā)展。該法為血吸蟲免疫診斷的主要方法,與糞檢陽性符合率達(dá)95%一99%,假陽性為1.3%一3.3%,與其他寄生蟲的交叉反應(yīng)除肺吸蟲外均較低。常規(guī)ELISA方法在抗原抗體檢測(cè)中敏感性高,特異性強(qiáng),但費(fèi)時(shí),成本高。為此,近年來改進(jìn)的ELISA有如下幾種。
?、倏焖?mdash;ELlSA。改進(jìn)特點(diǎn)為用PVC薄膜代替聚苯乙烯微量反應(yīng)板作載體;將1%可溶性血吸蟲卵抗原與尿素溶解性血吸蟲卵抗原等量相混合預(yù)吸附于薄膜上。該法主要以目視法判斷結(jié)果,整個(gè)操作流程僅需20min左右。
?、诎唿c(diǎn)—ELlSA(dot-ELISA)是近年新發(fā)展的一種ELISA技術(shù),選用對(duì)蛋白質(zhì)有很強(qiáng)吸附能力的硝酸纖維素薄膜作固相載體,底物經(jīng)酶促反應(yīng)后形成有色沉淀物使薄膜著色,然后目測(cè)或用光密度掃描儀定量。dot-ELISA可用來檢測(cè)抗體,也可用來檢測(cè)抗原,由于該法檢測(cè)抗原時(shí)操作較其他免疫學(xué)試驗(yàn)簡(jiǎn)便,故目前多用于抗原檢測(cè)。
③微波輻射ELISA(MWLELISA)。該法檢測(cè)全程僅需5min即可加底物顯色,判斷反應(yīng)結(jié)果。急性期和慢性感染陽性檢出率分別達(dá)到93%和64%以上(顧啟章等,1999)。
?、苋焖貳LISA。不用分離血清,檢測(cè)30nfin即可完成。
⑤磁珠—ELISA(MB-ELISA)。以磁珠作為固相載體,檢測(cè)日本血吸蟲的抗原。
⑥Cystatin—ELISA。應(yīng)用Cystatin捕獲血吸蟲吐出物中的半胱氨酸蛋白酶,再進(jìn)行ELISA試驗(yàn)檢測(cè)日本血吸蟲病人血清中相應(yīng)的特異抗體(黃躍龍等,2002)。
?、倏焖?mdash;ELlSA。改進(jìn)特點(diǎn)為用PVC薄膜代替聚苯乙烯微量反應(yīng)板作載體;將1%可溶性血吸蟲卵抗原與尿素溶解性血吸蟲卵抗原等量相混合預(yù)吸附于薄膜上。該法主要以目視法判斷結(jié)果,整個(gè)操作流程僅需20min左右。
?、诎唿c(diǎn)—ELlSA(dot-ELISA)是近年新發(fā)展的一種ELISA技術(shù),選用對(duì)蛋白質(zhì)有很強(qiáng)吸附能力的硝酸纖維素薄膜作固相載體,底物經(jīng)酶促反應(yīng)后形成有色沉淀物使薄膜著色,然后目測(cè)或用光密度掃描儀定量。dot-ELISA可用來檢測(cè)抗體,也可用來檢測(cè)抗原,由于該法檢測(cè)抗原時(shí)操作較其他免疫學(xué)試驗(yàn)簡(jiǎn)便,故目前多用于抗原檢測(cè)。
③微波輻射ELISA(MWLELISA)。該法檢測(cè)全程僅需5min即可加底物顯色,判斷反應(yīng)結(jié)果。急性期和慢性感染陽性檢出率分別達(dá)到93%和64%以上(顧啟章等,1999)。
?、苋焖貳LISA。不用分離血清,檢測(cè)30nfin即可完成。
⑤磁珠—ELISA(MB-ELISA)。以磁珠作為固相載體,檢測(cè)日本血吸蟲的抗原。
⑥Cystatin—ELISA。應(yīng)用Cystatin捕獲血吸蟲吐出物中的半胱氨酸蛋白酶,再進(jìn)行ELISA試驗(yàn)檢測(cè)日本血吸蟲病人血清中相應(yīng)的特異抗體(黃躍龍等,2002)。
制藥網(wǎng)
兴仁县|
郓城县|
华容县|
广宗县|
无棣县|
渝中区|
旺苍县|
开鲁县|
安新县|
游戏|
易门县|
长武县|
东兴市|
铁力市|
阿巴嘎旗|
莫力|
台江县|
突泉县|
百色市|
永寿县|
屯留县|
永平县|
苏尼特左旗|
高碑店市|
天等县|
康定县|
都江堰市|
祁连县|
台中市|
上虞市|
乡城县|
肇庆市|
荥阳市|
苏尼特右旗|
洛浦县|
聂荣县|
花垣县|
平阴县|
开封县|
北京市|
永胜县|