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間接血凝反應(yīng)法ELlSA診斷日本血吸蟲病
發(fā)布時間：2011-2-23
該法是以紅細胞為載體的抗原—抗體凝集反應(yīng)。采用微孔型有機反應(yīng)板，用凍干血凝抗原、被檢血清以生理鹽水作1；10、1：20、1：40稀釋，每孔加被檢血清0．05ml，再加致敏紅細胞抗原液l滴振蕩，靜置40-60min后觀察結(jié)果。如紅細胞呈顆粒凝結(jié)，不論是全部或部分均判為陽性。如紅細胞沉淀于孔底，也有新的發(fā)展。該法為血吸蟲免疫診斷的主要方法，與糞檢陽性符合率達95％一99％，假陽性為1．3％一3．3％，與其他寄生蟲的交叉反應(yīng)除肺吸蟲外均較低。常規(guī)ELISA方法在抗原抗體檢測中敏感性高，特異性強，但費時，成本高。為此，近年來改進的ELISA有如下幾種。
?、倏焖?mdash;ELlSA。改進特點為用PVC薄膜代替聚苯乙烯微量反應(yīng)板作載體；將1％可溶性血吸蟲卵抗原與尿素溶解性血吸蟲卵抗原等量相混合預(yù)吸附于薄膜上。該法主要以目視法判斷結(jié)果，整個操作流程僅需20min左右。
②斑點—ELlSA（dot-ELISA）是近年新發(fā)展的一種ELISA技術(shù)，選用對蛋白質(zhì)有很強吸附能力的硝酸纖維素薄膜作固相載體，底物經(jīng)酶促反應(yīng)后形成有色沉淀物使薄膜著色，然后目測或用光密度掃描儀定量。dot-ELISA可用來檢測抗體，也可用來檢測抗原，由于該法檢測抗原時操作較其他免疫學(xué)試驗簡便，故目前多用于抗原檢測。
?、畚⒉ㄝ椛銭LISA（MWLELISA）。該法檢測全程僅需5min即可加底物顯色，判斷反應(yīng)結(jié)果。急性期和慢性感染陽性檢出率分別達到93％和64％以上（顧啟章等，1999）。
?、苋焖貳LISA。不用分離血清，檢測30nfin即可完成。
⑤磁珠—ELISA（MB-ELISA）。以磁珠作為固相載體，檢測日本血吸蟲的抗原。
?、轈ystatin—ELISA。應(yīng)用Cystatin捕獲血吸蟲吐出物中的半胱氨酸蛋白酶，再進行ELISA試驗檢測日本血吸蟲病人血清中相應(yīng)的特異抗體（黃躍龍等，2002）。
?、倏焖?mdash;ELlSA。改進特點為用PVC薄膜代替聚苯乙烯微量反應(yīng)板作載體；將1％可溶性血吸蟲卵抗原與尿素溶解性血吸蟲卵抗原等量相混合預(yù)吸附于薄膜上。該法主要以目視法判斷結(jié)果，整個操作流程僅需20min左右。
②斑點—ELlSA（dot-ELISA）是近年新發(fā)展的一種ELISA技術(shù)，選用對蛋白質(zhì)有很強吸附能力的硝酸纖維素薄膜作固相載體，底物經(jīng)酶促反應(yīng)后形成有色沉淀物使薄膜著色，然后目測或用光密度掃描儀定量。dot-ELISA可用來檢測抗體，也可用來檢測抗原，由于該法檢測抗原時操作較其他免疫學(xué)試驗簡便，故目前多用于抗原檢測。
?、畚⒉ㄝ椛銭LISA（MWLELISA）。該法檢測全程僅需5min即可加底物顯色，判斷反應(yīng)結(jié)果。急性期和慢性感染陽性檢出率分別達到93％和64％以上（顧啟章等，1999）。
?、苋焖貳LISA。不用分離血清，檢測30nfin即可完成。
⑤磁珠—ELISA（MB-ELISA）。以磁珠作為固相載體，檢測日本血吸蟲的抗原。
?、轈ystatin—ELISA。應(yīng)用Cystatin捕獲血吸蟲吐出物中的半胱氨酸蛋白酶，再進行ELISA試驗檢測日本血吸蟲病人血清中相應(yīng)的特異抗體（黃躍龍等，2002）。