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　　1．動物的選擇純種BALB／C小鼠較溫順，離窩的活動范圍小，體弱，食量及排污較小，一般環(huán)境潔凈的實驗室均能飼養(yǎng)成活。目前開展雜交瘤技術(shù)的實驗室多選用純種BALB／C小鼠。
　　
　　2．免疫方案免疫方案應(yīng)根據(jù)抗原的特性不同而定，選擇合適的免疫方案對細胞融合雜交的成功，并獲得高質(zhì)量的McAb至關(guān)重要。一般在融合前兩個月左右根據(jù)確立免疫方案開始初次免疫。對抗原的要求是純度越高越好，尤其是對于初次免疫所用的抗原。如為細胞抗原，可取1．0X107個細胞作腹腔免疫?？扇苄钥乖杓?福氏佐劑并經(jīng)充分乳化。如為聚丙烯酰胺電泳純化的抗原，可將抗原所在的電泳條帶切下，研磨后直接用于動物免疫。
　　
　?。?）可溶性抗原免疫原性較弱，一般要加佐劑，半抗原應(yīng)先制備免疫原，再加佐劑。常用佐劑有福氏*佐劑、福氏不*佐劑，方法如下。
　　
　　初次免疫抗原l～50pg加福氏*佐劑
　　
　　皮下多點注射或脾內(nèi)注射
　　
　?。ㄒ话?．8～1ml，0．2ml／點）
　　
　　↓3周后
　　
　　第2次免疫劑量同上，加福氏不*佐劑
　　
　　皮下或腹腔內(nèi)注射
　　
　　（腹腔內(nèi)內(nèi)注射，腹腔內(nèi)注射劑量不宜超過0．5m1）
　　
　　↓3周后
　　
　　第3次免疫劑量同上，不加佐劑，腹腔內(nèi)注射
　　
　?。?～7d后采血測其效價）
　　
　　↓2—3周
　　
　　加強免疫，劑量50～500~g為宜
　　
　　腹腔內(nèi)注射或靜脈內(nèi)注射
　　
　?。o脈內(nèi)注射）
　　
　　↓3d后
　　
　　取脾融合
　　
　　目前，用于可溶性抗原（特別是一些弱抗原）的免疫方案也在不斷更新，如：①將可溶性抗原顆?；蚬滔嗷?，一方面增強了抗原的免疫原性，另一方面可降低抗原的使用量。②改變抗原注入的途徑，基礎(chǔ)免疫可直接采用脾內(nèi)注射。③使用細胞因子作為佐劑，提高機體的免疫應(yīng)答水平，增強免疫細胞對抗原的反應(yīng)性。
　　
　?。?）顆粒抗原免疫性強，不加佐劑就可獲得很好的免疫效果。以細胞性抗原為例，免疫時要求抗原量為（1～2）X107個細胞。
　　
　　初次免疫1X107／0．5ml腹腔內(nèi)注射
　　
　　↓2～3周后
　　
　　第2次免疫lXl07／0．5ml腹腔內(nèi)注射
　　
　　↓3周后
　　
　　加強免疫（融合前3d）lXl07／0．5ml
　　
　　腹腔內(nèi)注射或靜脈內(nèi)注射
　　
　　取脾融合
　　
　　免疫過程和方法與多克隆抗血清制備基本相同，因動物、抗原形式、免疫途徑不同而異，以獲得價抗體為zui終目的。免疫間隔一般2—3周。一般被免疫動物的血清抗體效價越高，融合后細胞產(chǎn)生價特異抗體的可能性越大，而且單克隆抗體的質(zhì)量（如抗體的濃度和親和力）也與免疫過程中小鼠血清抗體的效價和親和力密切相關(guān)。末次免疫后3～4d，可分離脾細胞融合。