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對制備的McAb進(jìn)行系統(tǒng)的鑒定是十分必要的，應(yīng)做下述5個方面的鑒定。

1．抗體特異性的鑒定 除用免疫原（抗原）進(jìn)行抗體的檢測外，還應(yīng)該用與其抗原成分相關(guān)的其他抗原進(jìn)行交叉試驗，方法可用ELISA法、IFA法。例如：①制備抗黑色素瘤細(xì)胞的McAb，除用黑色素瘤細(xì)胞反應(yīng)外，還應(yīng)該用其他臟器的腫瘤細(xì)胞和正常細(xì)胞進(jìn)行交叉反應(yīng)，以便挑選腫瘤特異性抗原或腫瘤相關(guān)抗原的單克隆抗體。②制備抗重組細(xì)胞因子的單克隆抗體應(yīng)首先考慮是否與表達(dá)菌株的蛋白有交叉反應(yīng)，其次是與其他細(xì)胞因子間有無交叉反應(yīng)。

2．McAb的Ig類與亞類的鑒定 一般在用酶標(biāo)或熒光素標(biāo)記的第2抗體進(jìn)行篩選時已經(jīng)基本上確定了抗體的Ig類型。如果用的是酶標(biāo)記或熒光素標(biāo)記的兔抗鼠IgG或IgM，則檢測出的抗體一般是IgG類或IgM類。至于亞類則需要用標(biāo)準(zhǔn)抗亞類血清系統(tǒng)作雙擴(kuò)或夾心ELISA來確定。在作雙擴(kuò)試驗時，如加入適量的PEG（3％）更有利于沉淀線的形成。

3．McAb中和活性的鑒定 用動物或細(xì)胞的保護(hù)實驗來確定McAb的生物學(xué)活性。例如，如果確定抗病毒McAb的中和活性，則可用抗體和病毒同時接種于易感動物或敏感細(xì)胞，來觀察動物或細(xì)胞是否得到抗體的保護(hù)。

4．McAb識別抗原表位的鑒定 用競爭結(jié)合實驗測相加指數(shù)的方法測定McAb所識別抗原位點，來確定McAb的識別表位是否相同。

5．McAb親和力的鑒定 用ELISA或RIA競爭結(jié)合實驗來確定McAb與相應(yīng)抗原結(jié)合的親和力。