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EB病毒（epstein-barr virus，EBV）屬皰疹病毒科，有學者提出此病毒為第1個人類腫瘤病毒的候選者。EBV直徑為90～180nm，為20面體核衣殼，有162個衣殼體，含有1個蛋白核心和DNA分子，病毒基因組為線性雙鏈DNA。原發(fā)性感染發(fā)生在幼兒時，多為隱性感染，此后終身帶病毒；若原發(fā)感染發(fā)生在青春期后，則相當一部分為顯性感染。EBV感染患者后可出現(xiàn)傳染性單核細胞增多癥、X—連鎖淋巴增殖綜合征，以及與EBV相關的惡性疾病如鼻咽癌、霍奇金淋巴瘤等。
[測定方法] ELISA法
[方法學原理] 將純化的EB病毒抗原預包被于微孔板上，加入稀釋過的患者血清于相應微孔板中，若存在EBVAb-IgM則可與微孔板上包被抗原相結合。洗去未結合部分后，再加入酶聯(lián)結合物，與抗原抗體復合物結合，在顯色劑作用下發(fā)生顯色反應，顏色強度與樣本中EBVAb-IgM含量呈正相關。
[標本準備] 靜脈抽血2ml，不抗凝。
[試劑]
微孔板
樣品稀釋液
HRP-抗人IgM酶結合物
陰性對照
陽性對照
洗滌劑
TMB顯色液
終止液
[儀器設備] 酶標儀或全自動酶聯(lián)免疫檢測儀。
[測定步驟]
1．將待檢血清編號，用樣品稀釋液作1；100稀釋。
2．根據(jù)用量取出相應孔數(shù)的微孔板條，其余部分密封后4℃環(huán)境中保存。
3．加人已稀釋的待檢血清、陰性對照，陽性對照各lOOgI至反應孔內，陰性對照、陽性對照設復孔，設空白對照1孔（空白孔不加任何試劑），振蕩混勻，37℃環(huán)境中溫育1h。
4．棄去孔中液體，用洗滌液洗滌5次，拍干。
5．每孔加入酶標記物lOOtA，混勻，37℃環(huán)境中水浴1h。
6．棄去孔中液體，用洗滌液洗滌5次，拍干。
7．向每孔加入底物A液和底物B液各2滴，置室溫環(huán)境中10min，每孔再加終止液50gl終止反應。
8．以空白對照（只加蒸餾水200g1）校零，在波長450nm處讀取各孔的OD值，凡樣品孔OD大于或等于陰性對照孔2倍，該樣品即為陽性。
[正常參考值] EBVAb-IgM陰性
[注意事項]
1．使用前試劑盒應預先在室溫環(huán)境中平衡30min。
2．試劑盒在2—8℃避光保存，啟用后應盡快用完。
3．不同批次的試劑組分不能混用。
4．實驗后試劑、血清標本均應視為有傳染性物質。
5．用滴瓶滴加時，滴瓶應垂直，用力和速度應均勻；加樣后，充分混勻。