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[測定方法] ELISA法
[方法學(xué)原理] 將純化的EB病毒抗原預(yù)包被于微孔板上，若待測樣本中存在EBVAb-IgA，則可與微孔板上預(yù)包被的EB—VAg結(jié)合，再加入酶聯(lián)試劑與抗原抗體復(fù)合物結(jié)合，在顯色劑作用下發(fā)生顯色反應(yīng)，顏色的深淺與樣本中抗體含量呈正相關(guān)。
[標(biāo)本準(zhǔn)備] 靜脈抽血2ml，不抗凝。
[試劑]
1．微孔板
2．樣品稀釋液
3．酶結(jié)合物
4．陰性對照
5．陽性對照
6．洗滌劑
7．TMB顯色液
8．終止液
[儀器設(shè)備] 酶標(biāo)儀或全自動酶聯(lián)免疫檢測儀。
[測定步驟]
1．將待檢血清編號，用樣品稀釋液作1：100稀釋。
2．根據(jù)用量取出相應(yīng)孔數(shù)的微孔板條，其余部分密封后4℃保存。
3．加入已稀釋的待檢血清，陰性對照，陽性對照各100t．tl至反應(yīng)孔內(nèi)，陰性對照、陽性對照設(shè)復(fù)孔，設(shè)空白對照1孔（空白孔不加任何試劑），振蕩混勻，37C環(huán)境中溫育1h。
4．棄去孔中液體，用洗滌液洗滌5次，拍干。
5．每孔加入酶標(biāo)記物100fA，混勻，37℃環(huán)境中水浴1h。
6．棄去孔中液體，用洗滌液洗滌5次，拍干。
7．向每孔加入底物A液和底物B液各2滴，置室溫環(huán)境中10min，每孔再加終止液50ul終止反應(yīng)。
8．空白對照（只加蒸餾水200g1）校零，在波長450nm處讀取各孔的OD值，凡樣品孔OD大于或等于陰性對照孔 2倍，該樣品即為陽性。
[正常參考值] EBVAb—IgA陰性
[注意事項]
1．使用前試劑盒應(yīng)預(yù)先在室溫環(huán)境中平衡30min。
2．試劑盒在2～8℃避光保存，啟用后應(yīng)盡快用完。
3．不同批次的試劑組分不能混用。
4．實驗后試劑、血清標(biāo)本均應(yīng)視為有傳染性物質(zhì)。
5．用滴瓶滴加時，滴瓶應(yīng)垂直，用力和速度應(yīng)均勻；加樣后充分混勻。
[臨床意義] EBVAb-IgM陽性是EBV近期感染的指標(biāo)，常見于傳染性單核細(xì)胞增多癥。該抗體在患者感染不久后就轉(zhuǎn)陽，但通常存在時間較短。
EBVAb—IgA陽性見于鼻咽癌，可用于鼻咽癌療效觀察與預(yù)后判斷；也可見于肺癌、甲狀腺癌、慢性鼻咽部炎癥，但陽性率一般不高。正常人也有部分陽性，陽性率約為3．4％。