品名：食品中染料的檢測固相萃取柱

品牌：天津博納艾杰爾

型號：Cleanert Sudan

GB/T 19681-2005《食品中染料的檢測方法 高效液相色譜法》中采用正己烷作為萃取溶劑，用氧化鋁固相萃取柱凈化樣品。該方法樣品處理過程復(fù)雜，且氧化鋁的活性不易控制，回收率難以得到保證。

本實驗利用裝填具有芳香性功能基團的聚合物材料的Cleanert Sudan固相萃取柱萃取辣椒油、辣椒粉等食品中4種，然后再用二氯甲烷洗脫，開發(fā)了一套食品中4種檢測的新方法，與國標(biāo)方法相比，可獲得更穩(wěn)定的回收率，溶劑用量更少更環(huán)保，方法也更簡便。

(1) 樣品提取及凈化

1.1 辣椒粉等粉狀樣品

稱取0.5g(準確至0.001g)樣品于三角瓶中，加入5mL正己烷，超聲10min，過濾，將濾液于5000r/min下離心5min后取上清液3mL，待凈化。

加標(biāo)樣品的處理：向0.5g(準確至0.001g)辣椒粉中加入2mL的4μg/mL混標(biāo)以及4mL正己烷，然后按照上述方法進行預(yù)處理。

1.2 辣椒油等油狀樣品

稱取0.5g(準確至0.001g)樣品于小燒杯中，加入3mL正己烷溶解，渦旋1分鐘混勻，待凈化。

加標(biāo)樣品的處理：向0.5g(準確至0.001g)辣椒油樣品中加入1mL的4μg/mL混標(biāo)，然后按照上述方法進行處理。

1.3 火腿腸類樣品

將火腿腸切成小丁，稱取3.0g(準確至0.001g)，放入10mL離心管中，加入5mL正己烷，超聲10min，5000r/min離心5min后取上清液3mL，待凈化。

加標(biāo)樣品的處理：將火腿腸切成小丁，稱取3.0g(準確至0.001g)，放入10 mL離心管中，加入2mL的4μg/mL混標(biāo)以及4mL正己烷，然后按照上述方法進行處理。

1.4 火鍋底料等醬類樣品

稱取火鍋底料1.0g(準確至0.001g)，加入1mL水，再加5mL正己烷，渦旋3分鐘，超聲10分鐘，接著以轉(zhuǎn)速6000r/min離心5分鐘，取上層有機相3mL，加入0.5g，渦旋0.5分鐘，靜置取上清液作為上樣液。

加標(biāo)樣品的處理：向1.0g(準確至0.001g)火鍋底料中加入1mL水，再加2mL的4μg/mL混標(biāo)及4mL正己烷，然后按照上述方法進行處理。

(2) 凈化方法

凈化樣品所用固相萃取柱為Cleanert Sudan專用柱(500mg/6mL)

1. 活化：在Cleanert Sudan專用柱中依次加入5mL二氯甲烷，5mL正己烷。

2. 萃?。簩?.1中的待凈化液加入Cleanert Sudan柱中，再用1mL正己烷洗滌樣品瓶，一并加入SPE柱中，流出液棄去。

3. 淋洗：待上樣液流出后，用3mL 3%異丙醇-正己烷溶液淋洗，淋洗液棄去，開啟真空泵，將小柱抽干。

4. 洗脫：3mL二氯甲烷洗脫，收集洗脫液。

5. 吹干與定容：將洗脫液于50℃下氮氣吹干，加入1mL乙腈溶解，使用0.45μm PTFE有機濾膜過濾后，進行HPLC分析。

(3) 色譜條件

色譜柱：Venusil MP C18 5μm 100?，4.6×150mm

流動相：乙腈：水=97：3(v/v)

流 速：1.0mL/min

進樣量：20μL

柱 溫：35℃

檢測波長：520nm

(4) 實驗結(jié)果

液相色譜條件下，將濃度為4μg/mL的標(biāo)準溶液進行HPLC分析，得到4種標(biāo)準溶液色譜圖如圖1所示。

圖1 4 種標(biāo)準溶液液相色譜圖:

Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ保留時間分別為：4.498min、6.673min、8.923min、14.165min。

經(jīng)由上述樣品處理方法處理的辣椒粉、辣椒油、火腿腸、火鍋底料及其加標(biāo)樣品，經(jīng)HPLC分析，得到色譜圖見圖2~圖9。

圖2 辣椒粉樣品的液相色譜圖:

圖3 辣椒油樣品的液相色譜圖:

圖4 火腿腸樣品的液相色譜圖:

圖5 火鍋底料樣品的液相色譜圖:

表2 4 種樣品中的平均加標(biāo)回收率及RSD 值:

結(jié)論

Cleanert Sudan能很好去除油脂中的雜質(zhì)，可獲得穩(wěn)定的加標(biāo)回收率，樣品前處理的操作過程簡單，所需耗材少。辣椒粉、辣椒油、火腿腸和火鍋底料這四種不同的實驗樣品中4種的加標(biāo)回收率都較理想。

(5) 訂貨信息: