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 在比色分析中，有色物質溶液顏色的深度決定于入射光的強度、有色物質溶液的濃度及液層的厚度。當一束單色光照射溶液時，入射光強度愈強，溶液濃度愈大，液層厚度愈厚，溶液對光的吸收愈多，它們之間的關系，符合物質對光吸收的定量定律，即Lambert-Bear 定律。這就是分光光度法用于物質定量分析的理論依據。