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更新時(shí)間：2023-10-25 11:20:02瀏覽次數(shù)：361次
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質(zhì)量光度儀分析儀器是一種革命性的分析生物分子的新方法，即超微量單分子質(zhì)量和分布測量分析法。它能夠在溶液中精確測量單個(gè)分子的質(zhì)量，不需要任何偶聯(lián)固化或者標(biāo)記標(biāo)簽，在天然狀態(tài)下，完成對生物分子的分析。這種方法為生物分析和生物分子功能研究開辟了新的可能性
2018年，牛津大學(xué)的Philipp Kukura團(tuán)隊(duì)宣布一種全新技術(shù)：在干涉反射顯微鏡和干涉散射顯微鏡的原理之上，通過單分子散射光的方式準(zhǔn)確測量溶液中單個(gè)分子的質(zhì)量，為生物分析和研究生物分子的功能開辟了新的方法：質(zhì)量光度法
質(zhì)量光度法是一種革命性的分析生物分子的新方法，即超微量單分子質(zhì)量和分布測量分析法是一種革命性的分析生物分子的新方法。它能夠在溶液中準(zhǔn)確測量單個(gè)分子的質(zhì)量，不需要任何偶聯(lián)固化或者標(biāo)記標(biāo)簽，在天然狀態(tài)下，完成對生物分子的分析。這種方法為生物分析和生物分子功能研究開辟了新的可能性 ，可以以很高的靈敏度、速度、準(zhǔn)確度和簡單性來表征感興趣的分子，是監(jiān)測蛋白質(zhì)純化、優(yōu)化樣品、研究蛋白質(zhì)功能和相互作用的理想儀器。所有測量都可在各種各樣的天然緩沖液中逐個(gè)分子地完成，無需標(biāo)記裝飾，就可以直觀地解釋質(zhì)量分布結(jié)果。
質(zhì)量光度儀分析儀器的特點(diǎn)：
· 準(zhǔn)確表征樣品的天然屬性；
• 保持結(jié)構(gòu)完整性和活性；
測量只需要幾微升的樣品；
• 設(shè)計(jì)緊湊的臺式儀器，無特殊安裝要求；
• 軟件自動控制采集過程，并在幾分鐘內(nèi)進(jìn)行質(zhì)量分析；
• 直觀地解釋質(zhì)量分布的結(jié)果，而不需要任何經(jīng)驗(yàn)和知識；
• 準(zhǔn)確測量在溶液（而不需真空）中的蛋白分子質(zhì)量；
• 單分子分析，可靠區(qū)分樣品中所有已知和未知組分，高精度捕獲高豐度和低豐度分子；
• 快速、簡單、最小樣本量：納米濃度下的微升樣品體積，幾分鐘內(nèi)獲得結(jié)果，寬質(zhì)量范圍和高動態(tài)范圍；
質(zhì)量光度儀分析儀器應(yīng)用領(lǐng)域 ：
樣品純度和成分分析 Sample characterization
異質(zhì)生物分子的質(zhì)量分析測量 Protein oligomerization
生物分子間相互作用 Biomolecular interactions
蛋白質(zhì)復(fù)合物的組裝與化學(xué)計(jì)量 Macromolecular assemblies
質(zhì)量光度法的技術(shù)路線：
質(zhì)量光度法（一）-iSCAT法觀察單個(gè)分子
質(zhì)量光度法（二）-SNR分析處理
質(zhì)量光度法（三）-分子計(jì)數(shù)
質(zhì)量光度法（四）-對比分子量轉(zhuǎn)換
質(zhì)量光度儀TwoMP分析儀器的特點(diǎn)：
緊湊的臺式儀器，安裝要求低——測量只需要幾微升的樣品、和干凈、高質(zhì)量的蓋玻片，幾分鐘內(nèi)可獲得結(jié)果；
直觀高效——Refeyn的軟件自動控制采集過程，并在幾分鐘內(nèi)完成質(zhì)量分析。您可以直觀地解釋質(zhì)量分布結(jié)果，而無需任何先驗(yàn)知識；
的精確性——由于其高靈敏度，非常適合在生理（低）濃度下進(jìn)行測量，而單分子計(jì)數(shù)技術(shù)固有的高動態(tài)范圍確保低豐度分子仍能被準(zhǔn)確捕獲。質(zhì)量光度法能輕松量化不同種類的蛋白質(zhì)分子，具有高分辨率和重復(fù)性；
性能參數(shù)
原理：干涉光散射，無需標(biāo)記
質(zhì)量范圍：30kDa – 5MDa
測量精度：±2% @ 10 nm
單次測量質(zhì)量誤差：±5% @ 10 nm
分辨率（FWHM）：25kDa @ 66kDa，60KDa @ 660 kDa
濃度范圍：100pM - 100nM（粒子濃度）
靈敏度：< 1ng蛋白質(zhì)
樣品體積：5 - 20 μ l
幀率（標(biāo)準(zhǔn)設(shè)置）：1 kHz（原始），100 Hz（集成）
視場：4 x 11µm （@ 500 Hz）至12 x 17µm（@ 135 Hz）
波長：488 nm
像素尺寸：12nm
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