，HisTrap HP, 5 x 1 ml，IMAC層析柱

 HisTrap HP是帶有鎳電荷的IMAC層析柱，用于高分辨率標簽蛋白純化，具有高結(jié)合載量，可限度地回收。

    產(chǎn)品特點

    HisTrap HP預填充柱為標記（His-tag）重組蛋白的制備純化提供了一種快速，方便和重復性好的形式。

    高分辨率：平均粒徑為34μm

    高載量：每毫升樹脂至少可結(jié)合40毫克His標簽蛋白

    可忽略不計的鎳泄漏：有助于保持活性和限度地減少蛋白質(zhì)沉淀

    廣泛的試劑兼容性：兼容各種還原劑，去垢劑，變性劑和其他添加劑

    方便的HiTrap形式：1毫升和5毫升預裝柱，兼容注射器，蠕動泵或?qū)游鱿到y(tǒng)（如AKTA或其他FPLC系統(tǒng)）

    產(chǎn)品維護

    Ni柱的使用與保養(yǎng)

    1. 對于一般的預裝柱（Crude系列除外），上樣前，樣品需要使用0.22μm/0.45μm濾膜進行過濾或者離心處理，以避免樣品中有細胞碎片等固體物質(zhì)，堵塞柱子。

    2. 如果細胞裂解后非常粘稠，需考慮是否因為DNA、RNA這類核酸物質(zhì)過多，需要加入核酸酶去除，以降低樣品粘稠度，提高上樣速度及洗脫效果。

    3. 柱子使用過程中，不能超過填料的壓力，以免填料被壓塌。

    4.每次使用后，可使用5-10倍柱體積的純水或者結(jié)合緩沖溶液對柱子進行清洗。（如果出現(xiàn)載量嚴重下降或者壓力增加，需考慮清洗）

    CIP（清洗）

    常規(guī)柱子（除了Ni excel）如出現(xiàn)反壓嚴重升高或者柱子明顯顏色改變，說明柱子需要進行的清洗。

    1. 脫鎳：

    （1） 脫鎳緩沖液：20mM 磷酸緩沖液，0.5M NaCl，50mM EDTA，pH 7.4。

    （2） 使用5-10個柱體積的脫鎳緩沖液沖洗柱子。

    （3） 然后再用5-10個柱體積的水沖洗柱子。

    2. 去除沉淀蛋白、疏水性蛋白及脂蛋白：將柱子置換到1M NaOH中，室溫1-2小時（若需要去除內(nèi)毒素可延長至12小時），再用5-10個體積去離子水沖洗。

    3. 去除強離子吸附蛋白：使用1.5M NaCl洗柱子，約10-15分鐘，然后用大約10個體積去離子水沖洗。