負(fù)峰原因總結(jié)
1. 流動相相關(guān)原因
?、倭鲃酉嗯c樣品溶劑的吸收差異：如果流動相在檢測波長下有吸收，并且進樣溶劑(樣品溶解液)的吸收低于流動相，就可能產(chǎn)生倒峰。例如，在紫外檢測中，當(dāng)進樣溶劑是水，而流動相含有在檢測波長下有吸收的有機成分(如)時，205nm下進樣時就可能出現(xiàn)倒峰。因為水的吸收比流動相吸收小，在檢測器處信號強度出現(xiàn)短暫下降，導(dǎo)致倒峰。
?、诹鲃酉嗟膬上嗟奈詹町悾罕热缦聢D中，220nm下，/TFA水溶液等度條件，提高比例，由于的截止波長190nm比較低，因此會出現(xiàn)基線下漂，然后回到等度條件，基線又上移一段，所以會出現(xiàn)一段負(fù)峰。
③流動相中有氣泡：氣泡在流動相中會干擾光路或者改變流動相的物理性質(zhì)。當(dāng)氣泡通過檢測器時，可能會使檢測器接收到的信號突然降低，從而產(chǎn)生倒峰。這在使用梯度洗脫時更為常見，因為梯度變化可能會引起空氣的溶解度發(fā)生變化，導(dǎo)致氣泡析出；還會致使系統(tǒng)壓力發(fā)生變化，使得空氣得以進入檢測器。
2. 檢測器相關(guān)原因
?、贆z測器故障或設(shè)置錯誤：檢測器的光源不穩(wěn)定或者檢測元件出現(xiàn)故障都可能導(dǎo)致信號異常。例如，紫外 - 可見檢測器的氘燈老化，其發(fā)射的光強度不穩(wěn)定，可能會使檢測信號出現(xiàn)波動，產(chǎn)生倒峰。此外，檢測器的時間常數(shù)、波長設(shè)置等參數(shù)如果不正確，也可能導(dǎo)致倒峰。如果時間常數(shù)設(shè)置過大，信號響應(yīng)會變得遲緩，可能會錯誤地將一些快速變化的信號記錄為倒峰。
?、跈z測器流通池問題：流通池內(nèi)有污染物或者氣泡，會影響光的傳播和檢測。當(dāng)污染物阻擋光路或者氣泡改變光路的折射時，會使檢測器接收到的信號發(fā)生變化，產(chǎn)生倒峰。例如，在長期使用后，流通池的內(nèi)壁可能會吸附一些樣品殘留或者流動相中的雜質(zhì)，影響檢測效果。
?、凼静顧z測器問題：示差折光檢測器測的信號是折射率，當(dāng)樣品的折光系數(shù)小于流動相溶劑的折光系數(shù)時會出現(xiàn)倒峰，出現(xiàn)倒峰的原因是待測組分的折射率小于流動相。
4. 進樣器原因
進樣時出現(xiàn)斷流，樣品對原有流動相產(chǎn)生瞬間阻斷，然后瞬間涌流，所以產(chǎn)生先倒后高的“溶劑峰”。
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