請(qǐng)您提供產(chǎn)品貨號(hào)、批號(hào)、實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)等相關(guān)信息，以便能快速而高效的為您服務(wù)（貨號(hào)及批號(hào)見(jiàn)試劑盒外包裝）

1. 當(dāng)與儀器方法結(jié)果相比時(shí)，試劑盒的結(jié)果偏高這是很正常的現(xiàn)象。因?yàn)閮x器方法僅測(cè)量的單一化合物，而試劑盒中的抗體由于不僅能識(shí)別目標(biāo)分子且還能識(shí)別結(jié)構(gòu)上相似的分子，包括其相關(guān)的代謝產(chǎn)物。因此，使用人員需要明白本產(chǎn)品的局限性和對(duì)數(shù)據(jù)做出合理的分析。

2. 任何試劑、檢測(cè)程序的改變都可能導(dǎo)致檢測(cè)失敗。

3. 不要使用超過(guò)有效期的產(chǎn)品；不同批次的產(chǎn)品不得混用。

4. 實(shí)驗(yàn)用水的質(zhì)量很重要，請(qǐng)使用蒸餾水或去離子水。

5. 微孔板開(kāi)封后，需置于有干燥劑的密封袋中冷藏保存，建議于一個(gè)月內(nèi)使用完。

l 酶標(biāo)儀：配備450nm波長(zhǎng)

l 單道移液器：0.5-10、20-200、100-1000μL、0.5-5mL量程各一支

l 多道移液器：30-300μL量程一支

l 白色、黃色和藍(lán)色吸頭若干

l 恒溫培養(yǎng)箱

l 均質(zhì)器或絞肉機(jī)

l 甲醇，分析純

l 二甲基亞砜，分析純

準(zhǔn)備

(1) 樣本提取液

     分別取甲醇70mL和二甲基亞砜 30mL混勻備用。

(2) 1×樣本稀釋液

     取4×樣本稀釋液1份，加入3份去離子水混勻，比如1mL+3mL    

辣椒油、火鍋底料

火鍋底料、凝固性油樣，可以加熱至樣品溶化后再稱量

(1) 稱取0.2g均質(zhì)的樣本于一合適的容器中，加入10mL樣本提取液渦旋2min;

(2) 4000rpm，離心5min；

(3) 取上層液體0.1mL，加入9.9mL去離子水混勻；

(4) 再取0.1mL上一步混勻后溶液，加入0.9mL去離子水混勻

(5) 再取0.1mL上一步混勻后溶液，加入0.1mL1×樣本稀釋液混勻

稀釋倍數(shù)：1

干辣椒

 粉碎后，過(guò)40目篩

(1) 稱取0.2g均質(zhì)的樣本于一合適的容器中，加入10mL樣本提取液渦旋2min;

(2) 4000rpm，離心5min；

(3) 取上層液體0.1mL，加入9.9mL去離子水混勻；

(4) 再取0.1mL上一步混勻后溶液，加入0.9mL去離子水混勻

(5) 再取0.1mL上一步混勻后溶液，加入0.1mL1×樣本稀釋液混勻

稀釋倍數(shù)：1

新鮮辣椒以及辣椒醬等辣椒制品

   在均質(zhì)器或料理機(jī)上均質(zhì)呈勻漿

(1) 稱取0.2g均質(zhì)的樣本于一合適的容器中，加入10mL樣本提取液渦旋2min;

(2) 4000rpm，離心5min；

(3) 取上層液體0.1mL，加入9.9mL去離子水混勻；

(4) 再取0.1mL上一步混勻后溶液，加入0.9mL去離子水混勻

(5) 再取0.1mL上一步混勻后溶液，加入0.1mL1×樣本稀釋液混勻

稀釋倍數(shù)：1

檢測(cè)前準(zhǔn)備

l 所有試劑需回復(fù)至室溫（在20-25℃下，從試劑盒中取出并放置1-2h）;

l 檢測(cè)開(kāi)始前需準(zhǔn)備好所需試劑；

l 取出所需體積的試劑，其余放回盒內(nèi)；

l 未使用完的試劑請(qǐng)勿倒回原試劑瓶?jī)?nèi)，移取每一種試劑需更換吸頭，以免交叉污染；

l 請(qǐng)不要在通風(fēng)口、陽(yáng)光直射下檢測(cè)，以避免造成微孔微環(huán)境差異導(dǎo)致檢測(cè)失敗；

l 標(biāo)準(zhǔn)品、陽(yáng)性樣本以及用過(guò)的吸頭和器皿均應(yīng)做有毒廢棄物處理。

洗液（1×）配制

取1體積的20×濃縮洗液，加入19體積的去離子水或蒸餾水混勻

檢測(cè)步驟

(1) 移取50μL辣椒素標(biāo)準(zhǔn)品至相應(yīng)微孔中；

(2) 移取50μL樣本至相應(yīng)微孔中；

(3) 移取50μL酶結(jié)合物至所有微孔中；

(4) 加入50μL辣椒素抗體至每一所需微孔中，用手指肚輕輕敲擊微孔板架兩側(cè)混勻1min；

(5) 室溫（20-25℃）孵育20min；

(6) 甩干微孔板，加入300μL 洗液（1×），浸泡5s后倒出洗液，再重復(fù)4次，甩干并于無(wú)塵布上拍干；

(7) 加入100μL底物，室溫（20-25℃）避光孵育10min;

(8) 加入100μL終止液，于450nm下讀數(shù)

結(jié)果計(jì)算

(1) 以logit(B/B0）為y軸，以log（分析物濃度）為x，進(jìn)行線性擬合。

其中公式如下

a. B為標(biāo)準(zhǔn)品或樣本對(duì)應(yīng)的吸光度；

b. B0為零標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)應(yīng)的吸光度；

d. K為斜率；

e. C為截距

(2) 計(jì)算出樣本的平均吸度和樣本的B/B0值代入公式①中求出濃度并乘以對(duì)應(yīng)的稀釋倍數(shù)，即為樣本中待測(cè)物最終濃度；辣度換算公式【求得的濃度C_樣，（C_樣×1.142）/10即為樣本的辣度